胚胎期双酚A暴露对雄性仔鼠海马中组蛋白乙酰化的影响

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[目的]双酚A(Bisphenl-A,BPA)是世界上使用最广泛的工业化合物之一,是生产聚碳酸酯、热敏纸和环氧树脂等的重要原料,同时也是一种具备类雌激素效应的环境内分泌干扰物。本文主要研究胚胎期双酚A暴露对雄性仔鼠海马组织中组蛋白乙酰化/去乙酰化在基因和蛋白水平的表达,以期探索双酚A对组蛋白乙酰化这一动态过程的影响,探索双酚A的神经毒性作用,为进一步说明BPA对仔鼠的神经毒性机制奠定理论基础。[方法]Sprague-Dawley大鼠自怀孕后第9天(E9)至第20天(E20)灌服浓度分别为0.05、0.5、5、50mg/kg-body weight(BW)per day 的 BPA,选择出生后21天(PND21)及70天(PND70)的雄性小鼠进行后续试验。采取甲苯胺蓝染色、Real-time PCR、 Western blotting等技术,检测雄性仔鼠的脑组织形态结构及组蛋白乙酰化相关酶类(HDACs 和 HATs) mRNA和蛋白的表达,从而探索胚胎期BPA暴露对组蛋白乙酰化的影响。[结果](1)胚胎期BPA暴露影响了雄性仔鼠海马组织形态学的变化:尼氏小体(即神经细胞,包括锥体细胞和颗粒细胞)数目减少,体积变小,神经元皱缩。(2)胚胎期BPA暴露影响了出生后雄性仔鼠海马中组蛋白去乙酰化酶的表达:R eal-time PCR实验结果表明,与对照组相比较,BPA暴露组HDAC1及HDAC3 mRNA表达水平显著降低,HDAC2mRNA表达水平显著升高。Western blotting检测结果表示:与对照组相比,BPA暴露组的HDAC1、HDAC3 及 H3蛋白表达水平降低,HDAC2 及 Ac-Histone3蛋白表达水平显著升高。(3)胚胎期BPA暴露影响了出生后雄性仔鼠海马中的总组蛋白乙酰化酶的含量,其蛋白表达量显著升高。[结论]实验结果显示胚胎期双酚A暴露致使出生后雄性仔鼠的学习记忆能力的降低,其分子机制涉及表观遗传机制中组蛋白乙酰化水平的变化,揭示了BPA影响中枢神经系统和行为发育的复杂性。
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