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背景与目的 前列腺素(PGs)是参与炎症反应的重要化学介质,COX是PGs生物合成过程中的关键酶。到目前为止,至少发现COX存在两种异构体:结构型(COX-1)和诱导型(COX-2)。COX-1在生理状况下存在于各种细胞和组织中,不受各种刺激因子影响,表达水平稳定,有正常生理调节作用。COX-2在生理状况下的各种组织中几乎不表达,但能被各种刺激因子诱导,表达水平显著上升,从而增加PGs的合成,促进和放大炎症反应。 体外细胞培养和动物模型的研究都发现,炎症反应时,COX-2表达明显上升,而COX-1表达无明显改变,使用NSAIDs或选择性COX-2抑制剂后,能减少PGs合成,从而明显缓解和抑制炎症反应。国外通过大鼠移植模型研究发现,在移植物急性排斥反应时,COX-2mRNA出现高表达,提示COX-2和排斥反应有一定的联系,但具体机制还需要研究。 本实验采用同种异基因及同种同基因小鼠异位心脏移植模型,RT-PCR方法检测COX-2 mRNA在发生免疫排斥的移植物中的表达水平,以探讨COX-2在移植物炎症反应中的作用。 浙江大学医学院硕士研究生论文 材料和方法 1 采用主要组织相容性抗原(MHC)完全不合的两种近交系小鼠, 建立同种异基因和同种同基因心脏腹部异位移植动物模型 2 分组 A组为同种异基因移植组C578L旧]——一>SALB儿 B组为同种同基因移植组BALB/C—一>BALB汇 C组为模拟手术处理组 3 观察指标 移植后每大腹部触诊移梢心脏跳动情况 分别于3大,5天,7天后取各组移植心脏进行病理观察,以及 用逆转录聚合酶链反应(reverse transcrlptase-polymerase chain r e a c过 i o n,R T-P C R)检测 C O X-2 m R N A和 i N O S m R N A 实验结果 1 平均移植心脏存活时间为(7.0士1.0)天 2 COX-2 mRNA在3无,5天,7天同种异基因组移植心脏中表 达均为阳性,且呈增加趋势,在3大,5天,7天同种同基冈织 移植心脏及模拟手术组心脏中表达均为阴性 3 iNOS mRNA在 3天,5大,7大同种异基因组、同种同基因组 移植心脏及模拟手术组心脏中的表达均为阳性,iNOS mRNA在 同种异基因组移植心脏中的表达强度比同种同基回移植心脏及 模拟手术组心脏中的表达强度显著增加(P<0.01),且呈增加趋 势 2 浙江大学医学院硕士研究生论文 结论 在同种异基因小鼠移植心脏发生排斥反应时,心脏组织中 COx-2 mRNA和i*Os二*NA的表达均明显增加:随着排斥反应的 加重,COX-2 mRNA和 iNOS mRNA表达均呈增加趋势;在 3天、5 天、7天时 COX-2 mRNA和 iNOS mRNA呈协同表达状态。