黄芪注射液联合顺铂对HeLa细胞生长的影响

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目的:研究不同浓度黄芪注射液单独或联合顺铂对HeLa细胞生长的影响,并初步探讨其影响机制。方法:单独或联合应用不同浓度的黄芪注射液、顺铂作用于人宫颈癌HeLa细胞系,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2的表达。结果:1.MTT法检测对细胞生长的影响:(1)不同浓度黄芪组与对照组比较:24h时黄芪高浓度组的光密度值低于对照组,黄芪低浓度组的光密度值高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),黄芪中浓度组的光密度值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。48h、72h时黄芪高浓度组、黄芪中浓度组的光密度值低于对照组,黄芪低浓度组的光密度值高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)不同浓度黄芪组之间比较:24h、48h、72h时黄芪高浓度组的光密度值低于黄芪中浓度组、黄芪低浓度组,黄芪中浓度组的光密度值低于黄芪低浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。最佳的黄芪作用浓度为1000g·L-1。(3)组内不同时间比较:①对照组:48h、72h时光密度值高于24h时,差异均有统计学意义(P<0.05);48h时与72h时光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。②黄芪高浓度组:48h、72h时光密度值低于24h时,差异均有统计学意义(P<0.05);48h时与72h时光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。从而最佳的黄芪作用时间为48h。③黄芪中浓度组:72h时光密度值低于24h、48h时,差异均有统计学意义(P<0.05);48h时与24h时光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。④黄芪低浓度组:48h、72h时光密度值高于24h时,72h时光密度值高于48h时,差异均有统计学意义(P<0.05)。2.流式细胞仪检测细胞凋亡率:对照组、黄芪注射液组、顺铂组、黄芪注射液联合顺铂组HeLa细胞凋亡率(%)分别为1.00±0.14、2.69±0.21、12.5±0.18、16.8±0.26,且各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。3.Western blot检测凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2的表达:Bax、p53蛋白的表达量:黄芪注射液联合顺铂组最高,其次是顺铂组,对照组最低;Bcl-2蛋白的表达量:对照组最高,其次是黄芪注射液组,黄芪注射液联合顺铂组最低。同一蛋白表达量的各组之间均有显著性差异(P<0.05)。结论:高浓度的黄芪注射液对HeLa细胞有促凋亡作用,可协同顺铂增强对HeLa细胞的促凋亡作用,其作用机制与增强p53、Bax蛋白的表达、减弱Bcl-2蛋白的表达有关。
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