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构建三维细胞培养模型模拟体内肿瘤微环境,能为探索肝癌的侵袭转移机制、筛选有效抗癌药物提供新的研究工具。海藻酸钙凝胶微球是进行体外肝癌细胞培养的良好载体,本论文在传统海藻酸钙凝胶微球的基础上,通过改变微球制备条件以及在微球中添加肝脏脱细胞基质活性成分,构建了模拟体内肝癌微环境中基质特点的细胞培养模型,并对培养肝癌细胞的增殖、侵袭转移潜能等进行了评价。通过改变微球制备的凝胶浴,提高了微球的传质性能,发现使用氯化钠溶液(154 mmol/L)以1/1、1/2及1/3体积比稀释传统氯化钙凝胶浴(100 mmol/L),均可制备球形度较好、粒径均一的海藻酸钙凝胶微球;微球的粒径、海藻酸分子分布的均匀程度及物质通透性随氯化钙溶液被稀释倍数的提高而增加,但微球机械强度相应下降。微球传质性能的提高有利于包埋肝癌细胞的增殖,在培养15天时细胞增殖率较传统微球组提高1.6倍,但不影响细胞的侵袭转移潜能。在提高微球传质性能的基础上,通过添加肝脏脱细胞基质成分增强微球与肝癌微环境中基质的相似度。利用物理与化学组合的方法处理肝脏组织,能够获得保留主要细胞外基质成分、去除绝大部分细胞成分的肝脏脱细胞基质,并可进一步将其制备成溶液及粉末两种形式。在传统凝胶浴中,当肝脏脱细胞基质溶液与海藻酸钠溶液体积比为1:2,或肝脏脱细胞基质粉末在海藻酸钠溶液中的含量为1%(w/v)以下时,能够分别稳定制备球形度较好、粒径均一的复合微球。与传统微球中的细胞相比,肝脏脱细胞基质溶液-海藻酸钙微球中肝癌细胞的MMP2和MMP9活性提高,表明细胞的侵袭转移潜能增强;粉末浓度为1%(w/v)的肝脏脱细胞基质粉末-海藻酸钙微球可长时间促进包埋肝癌细胞的生长,细胞的MMP2和MMP9活性较肝脏脱细胞基质溶液-海藻酸钙微球培养时显著提高、尿激酶型纤溶酶原激活系统被激活、上皮-间充质转化相关分子的表达变化也更接近于体内肝癌组织。本论文的研究结果表明,改变海藻酸钙凝胶微球的制备条件及添加肝脏脱细胞基质活性成分,能够提高其与体内肝癌微环境中基质的相似度,从而促进了肝癌细胞的增殖,并提高了其侵袭转移潜能,为构建三维体外肝癌细胞培养模型提供了新的思路。