目的：乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤,占女性肿瘤发病的首位。我国乳腺癌的发病率亦是逐年升高,且有年轻化趋势。乳腺癌的侵袭、转移是导致最终治疗失败甚至死亡的主要原因。研究显示,乳腺癌转移与表皮生长因子受体( Epidermal Growth Factor Receptor； EGFR )/基质金属蛋白酶( Matrix Metalloproteinases , MMPs )分子信号传导系统密切相关。山慈菇、露蜂房都具有清热解毒、化痰散结、消肿止痛的功效,在临床中已被广泛应用,具有抗癌作用强、毒副作用小的特点,是防治乳腺癌转移的基本药对。本研究旨在通过体外实验观察中药药对“山慈菇-露蜂房”大鼠含药血清对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231 增殖抑制作用,并检测药物血清对 MDA-MB-231 细胞中 EGFR、MMP-9、TIMP-1基因表达的影响,探讨“山慈菇-露蜂房”的抗乳腺癌转移作用及机理,以求为临床提供抗乳腺癌转移的有效方药。 　　方法：1、选用 SD雌性大鼠 30只,按文献方法制备 5 组大鼠含药血清,每组 6 只,分别为生理盐水组、“山慈菇-露蜂房”低剂量组(4.5g/kg)、中剂量组(9g/kg)、高剂量组(18g/kg)、ADM组(9mg/kg·d)；2、应用MTT法检测各组含药血清对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231细胞增殖的影响；3、应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测“山慈菇-露蜂房”含药血清对人乳腺癌高转移细胞株 MDA-MB-231 EGFR、MMP-9、TIMP-1 基因表达的影响,并同时检测内参照β-actin基因的表达。 　　结果： 　　1 MTT比色法检测各组含药血清对细胞的体外生长抑制作用 　　1.1 MTT比色法检测各组含药血清对MDA-MB-231细胞的生长曲线的影响 　　与生理盐水组比较,随着时间的延长,“山慈菇-露蜂房”低、中、高剂量组、阿霉素组均能使细胞生长曲线下降,下降幅度依次由小到大。其中,24~48h时,中药大剂量组和阿霉素组含药血清对曲线的影响基本相同；48~72h 时,曲线下降的幅度中药大剂量组略大于阿霉素组；72~120h,阿霉素组大于中药大剂量组。 　　1.2 MTT比色法检测各组含药血清对MDA-MB-231细胞杀伤情况 　　用 MTT 比色法检测发现,三个剂量组的“山慈菇-露蜂房”含药血清对MDA-MB-231 细胞均有显著增殖抑制作用,而且有一定的剂量-时间依赖关系。从24h-120h,剂量从小到大,对MDA-MB-231 细胞抑制率由14.99%~20.21% 增至 21.31%~45.82%。 　　2 逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)法检测各组药物血清对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231 EGFR、MMP-9、TIMP-1基因表达的影响 　　2.1 10个生理盐水组样本中有8个EGFR基因呈高水平表达,其余2个呈低水平表达；10 个“山慈菇-露蜂房”高剂量组样本中有 9个 EGFR 基因呈低水平表达,其余1个呈高水平表达； 　　2.2 10 个生理盐水组样本有 7个 MMP-9 基因呈高水平表达,其余 3 个呈低水平表达；10个“山慈菇-露蜂房”高剂量组样本中有8个MMP-9基因呈低水平表达,其余2个呈高水平表达； 　　2.3 10个生理盐水组样本有8个TIMP-1基因呈低水平表达,其余2个呈高水平表达；10个“山慈菇-露蜂房”高剂量组样本中有8个TIMP-1基因呈高水平表达,其余2个呈低水平表达。 　　结论： 　　1 “山慈菇-露蜂房”对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231有抑制作用,在一定剂量范围内,呈剂量正相关。 　　2 “山慈菇-露蜂房”可以下调MDA-MB-231细胞体外EGFR、MMP-9基因表达,上调TIMP-1表达。 　　3 “山慈菇-露蜂房”具有抗乳腺癌转移的作用,其作用机制可能为：①抑制肿瘤EGFR基因表达,抑制MMP的逆转录合成；②改变MMP-9/TIMP-1比值,影响MMP-9的活性,从而减少MMP-9对基底膜的降解。