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猪圆环病毒(Porcine circovirus)属于圆环病毒科，圆环病毒属。是一种小的，无囊膜的单链负股环状DNA病毒。病毒分为PCV1和PCV2两种，其中PCV1无致病性，PCV2对猪具有致病性，与近年来世界各国普遍发生的断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)密切相关，该病主要以进行性消瘦和多系统病理损伤为特征，而且PCV2的感染可引起免疫抑制，容易继发或并发其他疾病，给世界养猪业造成了极大的经济损失。我国是养猪大国，对该病及其病原进行研究具有重要的意义。本文主要内容及结果如下:
根据Genbank发表的PCV2序列设计特异性引物，扩增ORF3基因和ORF3基因中196bp特异片段，将ORF3基因克隆到pMD-18T载体中，以10倍梯度稀释后的纯化质粒作为标准品，进行荧光定量PCR，绘制标准曲线，建立了猪圆环病毒Ⅱ型的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果表明，该方法能特异性检测PCV2，与其它猪源病毒无交叉反应，敏感性达到10个拷贝，是普通PCR的100倍，重复性试验变异系数均小于5％。临床应用表明，该方法可快速，准确地检测PCV2。实验数据证实，该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。从而为猪圆环病毒定量检测提供了科学的方法。
根据GenBank中已发表的猪圆环病毒Ⅱ型全基因组序列，设计两对引物，从本实验室构建的PCV2双拷贝DNA感染性克隆中扩增出猪圆环病毒Ⅱ型ORF1基因和ORF2截短基因，扩增的DNA片段分别约为962bp、580bp，与预期片段大小相同。将扩增的基因片段分别克隆到pQE30原核表达载体中，获得重组质粒pQE30-ORF1、pQE30-ORF2。重组细菌裂解物经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blot检测分析，含有重组质粒pQE30-ORF1、pQE30-ORF2的大肠杆菌M15均能够表达分子量约为40 kDa和27 kDa的融合蛋白，为蛋白功能研究和单克隆抗体的研制奠定了基础。