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目的;有研究发现,巨噬细胞在重症急性胰腺炎(severe acutepancreatitis,SAP)的发展发挥了重要作用。激活的巨噬细胞可导致全身炎症反应,引起脂质过氧化,促进细胞因子的过度分泌,破坏膜结构,导致的胰腺和胰外器官损伤,最终导致多器官功能障碍综合征。氯屈膦酸是一种人工合成的双膦酸盐,它通常被用来治疗骨质疏松症和其他因素引起的骨质改变。本研究利用脂质体携带纳米SPIO粒子应用MRI以及结合使用Clodronate诱导巨噬细胞凋亡进行SAP并发多器官损伤的诊断与治疗。
方法;通过共沉淀法制备了纳米Fe3O4微粒,并通过薄膜法将所制备的Fe3O4包覆于脂质体中,制备了SPIO脂质体以及Clodronate-SPIO脂质体。采用胰腺被膜下均匀注射牛磺胆酸钠(2ml/kg体重)制作SAP模型,将SD大鼠随机分为对照组(C)、SAP-SPIO脂质体组(P)、SAP+Clodronate-SPIO脂质体组(T)。2、6h后对各组大鼠进行;MRI扫描。扫描结束后,制模2h和6h后取肠系膜上静脉血液,检测各组大鼠血清中淀粉酶、ALT、AST、BUN、Cr、TNF-α、IL-6、DAO的含量,观察各组织(胰腺、肝、肾、肺及肠)的病理学变化及病理评分。对各组织进行普鲁士蓝染色、TUNEL及CD68的检测。
结果;透射电镜检查见脂质体大小均匀,脂质体对;Fe3O4纳米颗粒具有良好的包覆效果,平均粒径小于200nm,分散性较好。P组2、6hAMS、ALT、AST、BUN、Cr、DAO、TNF-α和IL-6含量较C组明显升高(P<0.01);T组AMS、ALT、AST、BUN、Cr、DAO、TNF-α和IL-6水平均显著低于P组(P<0.01)。C组胰腺、肝、肾、肺及肠未见明显改变,T组大鼠的胰腺、肝、肾、肺及肠病理变化均较P组明显减轻。肝肾组织信号强度P组、T组较C组明显减低,P组及T组信号强度稍降低,但无显著性变化。通过对各组织普鲁士蓝染色、TUNEL及CD68的检测出Clodronate脂质体可以诱导巨噬细胞凋亡,保护胰腺及胰外器官。
结论;Clodronate脂质体可选择性清除单核/巨噬细胞,减少炎症介质释放,对SAP大鼠胰腺及胰外器官的损伤有保护作用。SPIO可作为SAP时胰腺及胰外器官MRI检查的示踪剂。