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γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)是一种人体必需的脂肪酸,日常饮食中适当补充GLA有助于人体健康和疾病预防。本文试图筛选富含GLA的微藻,并优化培养条件,为通过微藻发酵生产GLA打下基础。 研究内容和结果如下: 1.藻株的筛选和鉴定 从野外采集分离的232株绿藻中初步筛选出30株能够完全异养生长的藻株。测定这30株绿藻的油脂含量和脂肪酸组成,得到1株富含γ-亚麻酸(γ-linolenicacid,GLA)的栅藻HSJ296。初步测试显示其总脂占细胞干重的13%,GLA占总脂含量的25.78%。通过形态观察和18S rDNA序列分析,鉴定为栅藻(Scenedesmus)种类。 2.HSJ296的培养和脂肪酸组成分析 (1)培养条件的优化 比较了不同温度、氮源和葡萄糖浓度,结果显示,最适培养温度为30℃,最佳氮源为4gL-1尿素,葡萄糖初始浓度在10-40 g L-1范围内都适合该藻的生长。 进行3L的发酵实验,120 h后,HSJ296的细胞干重可达到19.48 g L-1,总脂含量为12.1%,总脂中GLA的含量为42.42%,GLA的产率为0.2gL-1d-1。 (2)脂肪酸组成分析 通过分析不同培养条件下HSJ296的总脂脂肪酸组成,发现该藻总脂的脂肪酸主要由棕榈酸(C16∶0)、油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)和GLA组成,并且总脂中GLA的含量稳定,在35-45%之间。