本文研究补肾调经方对睾酮所致无排卵模型(androgenstERilizedrats，ASR)大鼠性腺轴及子宫的影响，以探讨其作用环节及作用机理，为补肾调经方治疗无排卵疾病的临床应用提供理论依据。 方法： 1无排卵大鼠模型制备、分组、给药及处死 取同日出生的9日龄SD雌性幼年大鼠60只，随机分为4组，一组颈背部皮下注射医用花生油0.05ml，为正常对照组，另3组分别在颈背部皮下注射丙酸睾丸酮0.125mg(0.05ml)为模型组。第22日龄断奶，同样条件饲养，不加饲维生素类制品。第70日龄阴道开口，连续阴道涂片两个性周期，阴道上皮无周期性变化，呈持续性角化，提示模型复制成功。正常对照组大鼠阴道上皮呈周期性变化。随机将模型动物分为模型组(模型组加生理盐水)、阳性药对照组(模型组加乌鸡白凤口服液)及中药治疗组(模型组加补肾调经方)。自第80日龄起，正常对照组自由饮水，其余各组每天分别灌以生理盐水、乌鸡白凤口服液和补肾调经方，连续60天，阴道细胞发生变化，选择同一动情周期处死大鼠。 2补肾调经方对无排卵模型大鼠下丘脑的影响 采用放射免疫分析方法，分别对四组大鼠的下丘脑β-内啡肽(β-EP)的含量进行比较。 3补肾调经方对无排卵模型大鼠腺垂体的影响 采用放射免疫分析方法，分别对四组大鼠血清中腺垂体分泌激素卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)的水平进行比较。采用光镜及电镜对腺垂体形态及超微结构进行观察。免疫组织化学染色观察转化生长因子β1(TGFβ1)、转化生长因子β1受体(TGFβRI)在腺垂体表达。 4补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢的影响 采用放射免疫分析方法，分别对四组大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)的水平进行比较。HE染色和免疫组织化学染色，观察卵巢形态学变化及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、TGFβ1、TGFβRI在卵巢的表达强度，并对卵巢称湿重。 5补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫的影响 采用Griess法对四组大鼠子宫一氧化氮含量进行比较，并对子宫称湿重。HE染色和免疫组织化学染色，观察四组大鼠子宫形态学变化及ER、PR、TGFβ1、TGFβRI在子宫的表达强度。 结果： 1补肾调经方对无排卵模型大鼠下丘脑的影响 与模型组比较，正常对照组下丘脑β-EP含量明显降低(P＜0.05)。阳性药对照组、中药治疗组下丘脑β-EP含量无明显变化(P＞0.05)。 2补肾调经方对无排卵模型大鼠腺垂体的影响 2.1补肾调经方对无排卵模型大鼠腺垂体激素的影响 与模型组比较，正常对照组血清中FSH显著升高(P＜0.01)，PRL含量显著下降(P＜0.01)；阳性药对照组血清中FSH、LH、PRL含量无明显差异(P＞0.05)；中药治疗组血清中FSH水平显著升高(P＜0.05)，PRL含量显著下降(P＜0.05)，LH的水平无明显变化(P＞0.05)。 2.2补肾调经方对无排卵模型大鼠腺垂体形态学及超微结构的影响 模型组大鼠腺垂体结构稀疏，腺细胞数目明显减少；电镜显示促性腺细胞线粒体被破坏，内质网欠发达，分泌颗粒少。正常对照组大鼠腺垂体结构清晰，血窦丰富，腺细胞密集；电镜显示促性腺细胞内有丰富的线粒体和内质网，分泌颗粒多。阳性药对照组大鼠腺垂体结构有所改善，腺垂体细胞数目增加，电镜显示腺垂体促性腺细胞内有较多的线粒体、内质网和分泌颗粒。中药治疗组大鼠腺垂体的结构明显改善；电镜显示腺垂体促性腺细胞内有丰富的线粒体、内质网及大量的分泌颗粒。 2.3补肾调经方对无排卵模型大鼠腺垂体TGFβ1、TGFβRI表达的影响 与模型组比较，正常组、阳性药对照组、中药治疗组腺垂体TGFβ1、TGFβRI表达明显降低。 3补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢的影响 3.1补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢性激素影响 与模型组比较，正常对照组血清中P显著升高(P＜0.01)，E2、T含量显著下降(P＜0.01)；阳性药对照组血清中E2、P、T的含量无明显差异(P＞0.05)；中药治疗组血清中E2、T含量显著下降(P＜0.05)，P值无显著变化(P＞0.05)。 3.2补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢形态学的影响 模型组大鼠卵巢中卵泡囊状扩张，颗粒细胞层极薄。正常对照组大鼠卵巢可见发育期各级卵泡及大量黄体。阳性药对照组模型大鼠卵巢的结构有所改善，扩张卵泡的颗粒层增厚。中药治疗组模型大鼠卵巢的结构明显改善；卵泡发育并有典型黄体形成。 3.3补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢ER、PR的影响 与模型组比较，正常对照组、中药治疗组卵巢颗粒细胞、黄体ER的表达明显增加(P＜0.01)，阳性药对照组黄体中ER表达明显增加(P＜0.01)。 与模型组比较，正常对照组卵巢颗粒细胞、黄体PR的表达明显增加(P＜0.01)，阳性药对照组卵巢颗粒细胞、黄体中PR表达的平均灰度无明显变化(P＞0.05)；中药治疗组卵巢颗粒细胞、黄体中PR表达的平均灰度均明显降低(P＜0.01,P＜0.05)。 3.4补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢TGFβ1、TGFβRI表达的影响 与模型组比较，正常对照组、阳性药对照组、中药治疗组TGFβ1在卵巢颗粒细胞、间质细胞中的表达明显降低(P＜0.01)。 与模型组比较，正常对照组TGFβRI在卵巢颗粒细胞的表达明显降低(P＜0.01)；正常对照组、阳性药对照组、中药治疗组TGFβRI在卵巢间质细胞中的表达明显降低(P＜0.01)。 3.5补肾调经方对无排卵模型大鼠卵巢重量的影响 与模型组比较，正常对照组卵巢重量明显增加(P＜0.01)。阳性药对照组卵巢重量无明显变化(P＞0.05)。中药治疗组卵巢重量显著增加(P＜0.05)。 4补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫的影响 4.1补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫NO含量的影响 与模型组比较，正常对照组子宫NO含量明显增加(P＜0.05)；阳性药对照组子宫NO含量无明显变化；中药治疗组子宫NO含量明显增加(P＜0.05)。 4.2补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫形态学的影响 模型组大鼠子宫壁肌层较其他组变薄，子宫内膜也薄，腺体极少；正常对照组大鼠子宫内膜厚，腺体丰富；阳性药对照组大鼠子宫内膜明显增厚，腺体数目明显增多；中药治疗组模型大鼠子宫内膜增厚，腺体数目增多。 4.3补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫ER、PR表达的影响 与模型组比较，正常对照组ER在子宫腺、间质表达明显增加(P＜001)；阳性药对照组子宫ER、PR表达无明显变化；中药治疗组ER、PR在内膜上皮、子宫腺、间质表达明显增加(均为P＜001)，肌层表达明显增加(均为P＜005)。 4.4补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫TGFβ1、TGFβRI表达的影响 与模型组比较，正常对照组、阳性药对照组、中药治疗组TGFβ1在子宫内膜(腺细胞、间质细胞)、肌层表达的平均光度值明显增加(P＜001)。正常对照组、中药治疗组TGFβRI在子宫肌层表达的平均光度值明显增加(P＜005)(光度值越大，表达越强)。 4.5补肾调经方对无排卵模型大鼠子宫重量的影响 与模型组比较，正常对照组子宫重量亦明显增加(P＜0.05)；阳性药对照组子宫重量明显增加(P＜0.01)；中药治疗组子宫重量明显增加(P＜0.01)。 5补肾调经方与乌鸡白凤口服液对无排卵模型大鼠卵巢、子宫重量影响的比较 与阳性药对照组比较，中药治疗组大鼠卵巢重量明显增加(P＜0.05)；组织形态学观察，卵泡颗粒层细胞明显增厚，并见各级发育的卵泡和黄体；卵巢颗粒细胞ER、PR表达明显增强。中药治疗组卵巢颗粒细胞TGFβR1子宫肌层TGFβR1表达接近正常。而阳性药对照组卵巢颗粒细胞TGFβR1过度表达，子宫肌层TGFβR1表达没有明显变化。 结论： 1补肾调经方作用于垂体，改善垂体的结构，调节其内分泌功能；促进FSH和LH分泌，降低PRL水平，解除高浓度的PRL对性腺轴的抑制作用；调整垂体TGFβ1、TGFβRI的表达，从而促进卵泡发育、颗粒细胞增生。 2补肾调经方作用于卵巢，使卵巢ER、PR表达增强，使甾体激素更充分发挥生理效应；调整卵巢TGFβ1、TGFβRI的表达；增强卵巢的内分泌功能，促进卵泡的发育和排卵，并使卵巢重量增加，这可能是垂体调节和补肾中药共同作用。 3补肾调经方作用于子宫，促进子宫内膜发育，使子宫ER、PR表达增强，使甾体激素更充分发挥生理效应；通过上调子宫NO含量，促进子宫内膜血管扩张、血管通透性以及平滑肌舒张，促使内膜肌层水肿，有利于胚泡植入和蜕膜的形成；通过上调子宫内膜、肌层TGFβ1、肌层TGFβRI表达，促进子宫内膜生长，形成分泌期子宫内膜，有助于蜕膜化的形成，以适应孕卵着床和胚胎发育的需要。 补肾调经方可通过调节垂体、卵巢的内分泌功能，促进子宫发育等多途径、多环节共同发挥其调经的作用。在促进卵泡发育方面，补肾调经方优于乌鸡白凤口服液。