【摘 要】
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全球气候变暖导致农业干旱日益严重,逐渐成为农作物生长发育及产量的重大威胁。而番茄作为植物科学研究中重要模式植物,又作为最具经济价值的世界第二大果蔬作物,在不断精进灌溉技术的同时,全面深入的了解番茄对干旱胁迫的响应机制在提高番茄抗旱能力、培育抗旱新品种方面有着重要作用。目前,对GATA类转录因子的研究多集中在生长发育相关方面,对其抗逆分子调控机制研究较少。本实验室前期研究显示SlGATA17基因在干
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全球气候变暖导致农业干旱日益严重,逐渐成为农作物生长发育及产量的重大威胁。而番茄作为植物科学研究中重要模式植物,又作为最具经济价值的世界第二大果蔬作物,在不断精进灌溉技术的同时,全面深入的了解番茄对干旱胁迫的响应机制在提高番茄抗旱能力、培育抗旱新品种方面有着重要作用。目前,对GATA类转录因子的研究多集中在生长发育相关方面,对其抗逆分子调控机制研究较少。本实验室前期研究显示SlGATA17基因在干旱胁迫下上调表达,且利用VIGS基因沉默降低该基因表达量导致番茄植株的抗旱性降低。为了进一步明确SlGATA17基因的功能及其在番茄植株干旱应答调控中的作用机制,本论文以SlGATA17基因为研究对象,利用植物转基因和RNA-seq等方法,从表型、生理生化和分子水平展开研究,阐明SlGATA 17基因在番茄耐旱中的作用机理,为利用基因工程技术改良番茄的抗逆性提供理论依据。主要研究结果如下:(1)克隆获得了SlGATA17基因序列全长1402 bp,与数据库中公布的序列完全一致,ORF长984 bp,可编码327个氨基酸,氨基酸序列中包含一个GATA结构域。(2)通过构建绿色荧光蛋白基因GFP与目的基因融合的瞬时表达载体,转入烟草进行亚细胞定位分析,结果显示SlGATA17转录因子定位于细胞核。(3)对野生型植株外源喷施100 mg/L ABA进行诱导,表达模式分析结果表明S1GATA17基因受ABA诱导上调表达。(4)对转基因超表达及野生型植株以20%PEG干旱胁迫处理,综合植株表型及其MDA、Pro、SOD、POD、PAL生理指标及NBT、DAB染色结果,表明SlGATA17基因在番茄中的超表达能够提高番茄植株的抗旱性。(5)将对照植株与超表达植株在干旱胁迫下的三个时间点,三次重复,共18个样品进行转录组测序。结果表明转基因植株中差异表达基因在苯丙烷类合成通路中显著性富集,尤其是在干旱胁迫3小时后,该通路成为唯一显著差异富集代谢通路。
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