口腔颌面外科患者围手术期血中BDNF、VEGF、IL-17、IL-17F浓度测定及临床意义

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目的:  用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测口腔颌面外科围手术期患者血浆中脑源性神经营养因子BDNF的浓度并探讨其临床意义。探讨口腔颌面部鳞状细胞癌患者(OSCC组)、癌前病变患者(OPL组)与正常对照组(NC组)血浆中脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介17A(IL-17A)及白细胞介素17F(IL-17F)水平有无差别,并研究其相关性,观察其表达水平与口腔癌患者临床病理特征的关系。  材料和方法:  该实验取得山东大学口腔医学院伦理学会的同意,选择在山东省口腔医院行全麻手术治疗的患者(选择符合纳入标准的患者共118例,其中男63例,女55例,年龄21-77岁,平均年龄46.71±8.53岁,平均受教育年限8.75±3.94年),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,分别于:入院后清晨(T1)、气管插管成功且手术开始之前(T2)、缝合后(T3)、拔管后20min(T4)、术后第一日清晨(T5)取外周静脉血检测血浆中BDNF浓度,并采用汉密尔顿焦虑量表(Hamilton anxiety scale,HAMA,14项版)来评定患者围手术期的焦虑程度,通过GraphPad Prism5.0软件进行统计分析,采用非参数检验的曼-惠特尼U检验(Mann-Whitney U test)法来比较患者围手术期血浆中BDNF浓度变化,相关性分析采用spearman等级相关分析(spearman rank correlation analyze)法,以p<0.05为有统计学意义。  在住院患者中选择符合纳入要求的口腔颌面部鳞状细胞癌患者(OSCC组)、癌前病变患者(OPL组)分别入组,并于社会募集正常对照组(NC组),所有研究对象均于清晨空腹留外周静脉血样约3ml,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血浆中脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素17A(IL-17A)及白细胞介素17F(IL-17F)含量,通过GraphPad Prism5.0软件进行统计分析,相关性分析采用spearman等级相关分析(spearman rank correlationanalyze)法,三组均数之间的比较采用K-W检验(Kruskal-Wallis statistic),两两比较采用非参数检验的曼-惠特尼U检验(Mann-Whitney U test),以p<0.05为差异具有统计学意义。  结果:  1.患者一般状况包括年龄、性别、文化程度、经济状况、诊断时间、手术时间、手术持续时间,与其手术前(T1)及手术后(T2)血浆中BDNF的浓度均无明显相关关系,其差异无统计学意义(p>0.05)。  2.围手术期患者血浆中BDNF浓度:T1(626.5±283.7pg/ml)、T2(315.5±205.2pg/ml)、 T3(710.7±478.5pg/ml)、T4(663.8±533.4pg/ml)、T5(249.2±110.1pg/ml)。以T1为对照,T2患者血浆中BDNF浓度明显降低,差异有显著统计学意义(p=0.0017);在T3与T4测得血浆中BDNF浓度之间无明显差异(p=0.616),且与T1相比均没有明显差别(p=0.91,p=0.0673);T3患者血浆中BDNF浓度较T2明显升高,差异有显著统计学意义(p<0.01);T5患者血浆中BDNF浓度明显低于T1,差异有显著统计学意义(p<0.01)。  3.T3时刻测得血浆中BDNF浓度与手术持续时间长短之间呈正相关关系(rs=0.2289,p=0.0139),此时刻测得血浆中BDNF浓度值浮动最大(55pg/ml-1920pg/ml),而术后第一日清晨(T5)血浆中BDNF浓度与手术持续时间长短之间无明显相关关系(rs=0.1539,p=0.1006)。  4.患者术后的焦虑程度较术前明显加重,且差异具有统计学意义(p=0.011)。且患者术后的焦虑程度与其血浆中BDNF浓度呈负相关(rs=-0.308,~0.0008)。  5.口腔癌患者测得的血浆中BDNF浓度与癌前病变患者及正常对照之间比较无统计学差异(p=0.6227)。OSCC患者血中BDNF浓度与VEGF浓度之间无明显相关关系(rs=-0.1982,p=0.1508)。OSCC患者血中BDNF浓度与其临床病理学特征之间均无统计学意义。  6.OSCC组血浆中VEGF(172.4±76.25pg/ml)、IL-17A(33.19±12.6pg/ml)、IL-17F(115.3±51.52pg/ml);OPL组血浆中VEGF(130.3±45.24pg/ml)、IL-17A(24.67±11.62pg/ml)、IL-17F(152.9±70.08pg/ml); NC组血浆中VEGF(103.5±36.17pg/ml)、IL-17A(18.74±6.337pg/ml)、IL-17F(230.9±161.8pg/ml)。自OSCC组、OPL组至NC组,其血浆中VEGF和IL-17A的水平依次降低,而IL-17F的水平则为NC组最高,OSCC组最低,且差异均具有统计学意义。OSCC患者血浆中IL-17A与IL-17F的水平均与VEGF水平密切相关,且VEGF水平与IL-17A呈正相关(rs=0.3062,p=0.0243),与IL-17F呈负相关(rs=-0.27,p=0.0484),而IL-17A与IL-17F之间无明显相关性(rs=0.0456,p=0.7435)。  7.OSCC患者血中VEGF浓度与肿瘤直径(p=0.0181)、TNM分期(p=0.0169)、淋巴结转移(p=0.0249)及分化程度(p=0.008)具有明显相关关系。IL-17A浓度与吸烟(p=0.014)及TNM分期(p=0.0343)、淋巴结转移(p=0.0403)具有明显相关关系。IL-17F浓度与饮酒(p=0.0469)、吸烟(p=0.0272)及肿瘤直径(p=0.0124)、TNM分期(p=0.0334)及淋巴结转移(p=0.0465)具有明显相关关系。  8.通过拟合ROC曲线(receiver operating characteristic curve)检测VEGF、IL-17A与IL-17F的诊断效能,VEGF、IL-17A与IL-17F分别可能作为OSCC患者血中诊断标记物并与肿瘤进展相关,而IL-17F/VEGF联合可作为OSCC患者相对有效的肿瘤诊断标志物。  结论:  1.在围手术期,患者血浆中的BDNF浓度有特定的变化趋势且与麻醉及手术持续时间有关;全身麻醉可能会加重患者围手术期焦虑程度,其机制可能与血浆中BDNF水平降低有关。  2.OSCC患者血中BDNF与VEGF之间无相关关系且肿瘤的进展无直接相关。  3.OSCC患者血中VEGF、IL-17A、IL-17F的水平可能与肿瘤的进展相关,并且可能联合作为相对有效的肿瘤诊断标志物。
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