FGF8b模拟先导肽抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制

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目的:FGF8b能上调大部分前列腺癌细胞的增殖并对前列腺癌的发生及发展起到重要作用。在本文中,我们首次通过FGF8b-FGFR复合体结构的分析并合成了FGF8b的gN螺旋区的模拟先导肽8b-13。研究8b-13对前列腺癌细胞抗肿瘤活性,并探讨其相关的作用机制。方法:选用DU-145和PC-3两种前列腺癌细胞,用MTT法检测8b-13对细胞增殖的影响;PI染色结合流式细胞术分析8b-13对细胞周期的影响;Western blotting检测信号分子Erk1/2、P38、Akt的活化水平以及增殖相关蛋白(PCNA和cyclinD1)的表达水平;应用蛋白质组学的双向电泳和质谱联用技术,获得8b‐13处理前后FGF8b诱导的前列腺癌细胞中差异表达蛋白情况,并通过western blotting和Q‐PCR加以验证。结果:在本文研究中,8b-13可能通过特异性阻断FGF8b与受体的结合从而抑制前列腺癌细胞(PC-3和DU-145)的增殖。进一步的实验表明,8b-13可使细胞阻滞在G0/G1期,下调Erk1/2、P38、Akt信号分子的磷酸化水平并且降低G1/S期特异调控蛋白cyclinD1的表达。此外,实验得到了8个差异表达蛋白(如PAFAH1B2,ESD,CRABP2等),其中4种上调,4种下调,8b-13可能通过上调PAFAH1B2和ESD的mRNA水平以及下调CRABP2的mRNA水平和PCNA的蛋白表达来抑制细胞的增殖。结论:8b-13不仅具有潜在的抗前列腺癌功能,同时也证实了gN螺旋区域是FGF8b发挥生物学活性的重要结构域。
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