研究背景：　　原发性肝癌在全世界是发病率较高的恶性肿瘤之一，其发病率高、恶性程度和死亡率高。肝癌的发生发展是多环节、多因素、多步骤、多基因参与的过程，肝细胞最终有不典型增生发展到肝细胞癌变，其发病机制尚未完全明确。目前部分研究认为肝癌的发生与病毒性肝炎、高黄曲霉毒素、肝硬化、地理环境因素和基因变异等有密切关系。　　由于肝癌患者早期无特异性症状，多数患者在明确诊断是已进入中、晚期，尽管手术、介入、放疗及化疗等治疗手段在治疗肝癌方面取得一些重大进展，但肝癌患者的生存率及预后并无明显改善。因此，进一步阐明肝癌的发病机制，寻找防治的新靶点，成为医务工作者的尤为关注的问题。　　近年来有许多方法用于肝癌发生的病因及其发病机制的研究，利用DNA序列变异信息(基因多态位点)结合疾病表型进行连锁或关联分析是目前常用的鉴定致病位点，包括数量性状位点（quantitative trait locus，QTL）的主要研究策略之一。确定肝癌的致病基因对于其早期诊断、预防及靶向治疗，具有极为重要的意义。　　目的：　　本实验通过选取F344大鼠肝癌模型的QTL区域候选基因CDCA5和Rin1，分析CDCA5mRNA和Rin1mRNA在肝癌组织及其细胞株中的表达情况，初步探讨CDCA5mRNA和Rin1mRNA在肝癌发生中的作用。　　方法：　　1．选择候选基因：在Rat Genome Database中，输入相关搜索条件，检索出大鼠肝癌的23个QLT位点，于肝癌QTL位点重叠最多区域选择CDCA5及Rin1作为候选基因。　　2．动物模型：用化学诱癌剂3’-甲基-4-二甲氨基偶氮苯(3’-Me-DAB)诱导F344大鼠肝癌模型。　　3．细胞来源：本实验所采用的细胞均购自中山大学细胞库，共4株细胞。人肝癌细胞为：HepG3b、Huh7、HepG2，人正常肝细胞株为：HL-7702。　　4．人组织标本：选择20例近两年中山大学肿瘤医院及广州市第一人民医院原发性肝癌患者手术切除的新鲜肿瘤组织块、癌旁组织块（癌旁组织为距离瘤体边缘>15cm的组织）。均有病理结果证实。　　5．检测CDCA5mRNA及Rin1mRNA的表达：提取12例大鼠肝癌及正常组织、20例人体手术肝癌组织及对应癌旁组织、3株人肝癌细胞株（Hep3B、Huh7和HepG2）及其正常肝细胞株（HL7702）的总 RNA，逆转录试剂盒逆转录为cDNA，qRT-PCR检测CDCA5mRNA和Rin1mRNA在12例大鼠肝癌组织、20例人肝癌组织及3株人肝癌细胞系（Hep3B、Huh7和HepG2）及相应对照组织/细胞系中表达情况。　　6．统计分析各实验组数据以均数±标准差表示，采用SPSS16.0统计软件分析。满足正态分布或经转换后满足正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验，分布不满足正态时采用非参数检验，显著性水平为P<0.05。　　结果：　　1．选择CDCA5和Rin1作为肝癌致病基因的候选基因。　　2．成功构建F344大鼠肝癌模型，均有病理结果证实。　　3．CDCA5mRNA在肝癌中表达上调，其在雄性大鼠肝癌组织中表达拷贝数为雄性大鼠正常肝组织的233.94倍（P<0.05），在雌性大鼠肝癌组织中表达拷贝数为雌性大鼠正常肝组织的3169.82倍（P<0.05）；在人体肝癌组织中的表达拷贝数为癌旁组织的4.42倍（P<0.05）；在肝癌细胞株HepG3b的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的16.44倍（P<0.05），在HepG2中的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的6.23倍，在Huh7中的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的7.50倍（P<0.05）。　　4．Rin1mRNA在肝癌中表达不一致，其在雄性大鼠肝癌组织中表达拷贝数为雄性大鼠正常肝组织的143.93倍（P>0.05），在雌性大鼠肝癌组织中表达拷贝数为雌性大鼠正常肝组织的59.02倍（P<0.05）；在人体肝癌组织中的表达拷贝数为癌旁组织的0.51倍（P>0.05）；在肝癌细胞株HepG3b的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的2.06倍（P>0.05），在HepG2中的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的2.49倍，在Huh7中的表达拷贝数为正常肝细胞HL-7702的1.16倍（P>0.05）。　　5．统计学分析结果显示，CDCA5mRNA的表达与患者性别、年龄、AFP表达及肿瘤大小无关（P>0.05）。　　结论：　　1．在大鼠肝癌模型QTL区域筛选CDCA5mRNA、Rin1mRNA作为肝癌致病基因的候选基因。　　2．成功构建F344大鼠肝癌模型。　　3．CDCA5mRNA在大鼠肝癌组织、人原发性肝癌组织、人肝癌细胞株（HepG3b、Huh7、HepG2）中表达上调；Rin1mRNA在肝癌中表达不一致。　　4．CDCA5mRNA作为肝癌的致病基因，参与肝癌的发病机制；Rin1作为肝癌致病基因尚有待证实。