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为研究黑色素聚集激素(melanin-concentrating hormone,MCH)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)和促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)基因在齐口裂腹鱼摄食调控中发挥的作用,本试验首先利用RT-PCR和RACE技术首次克隆了齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)MCH、CRH和GnRH2的cDNA全序列；随后运用荧光定量PCR技术对MCH、CRH和GnRH2在不同组织的分布进行了检测；最后研究在不同摄食状态下MCH、CRH和GnRH2 mRNA在下丘脑表达的影响变化。研究结果表明：齐口裂腹鱼MCH cDNA全长序列为589bp,其中5’非编码区(5’-UTR)66bp,3’非编码区(3’-UTR)148 bp,开放阅读框(ORF)375bp,编码124个氨基酸包括N末端24个氨基酸的信号肽、C末端17个氨基酸的成熟肽和13个氨基酸的神经肽Mgrp,与金鱼(Carassius auratus)的MCH的序列同源性最高,相似性可达到90.3%；齐口裂腹鱼CRH cDNA全长序列的长度为1046 bp,其中5’-UTR为127bp,3’-UTR为430bp,ORF为489bp,编码162个氨基酸包括24个氨基酸的信号肽、41个氨基酸的成熟肽和11个氨基酸的保守区域,与鲤科鱼类特别是鲤鱼(Cyprinus carpio) CRH氨基酸序列一致性最高为96.3%；齐口裂腹鱼GnRH2 cDNA全长序列的长度为693 bp,其中5’-UTR为160 bp,3’-UTR为272bp,ORF为261 bp,编码86个氨基酸包括24个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的成熟肽和49个氨基酸的GnRH相关肽,其氨基酸序列与鲤鱼,稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)和斑马鱼(Danio rerio)的GnRH2具有很高的一致性分别为98.6%、95.9%、90.5%。利用qPCR对齐口裂腹鱼MCH、CRH和GnRH2 mRNA在不同组织的表达进行检测,结果显示：MCH、CRH和GnRH2 mRNA在脑部的表达量最高。MCH mRNA主要在大脑和垂体分布,而在其他外周组织几乎没有表达。进一步对脑部区域检测发现,MCH mRNA在下丘脑的表达最高,而在其他脑区域的表达都很低。CRHmRNA在外周组织中广泛表达,进一步研究CRH在脑部不同区域的表达的发现,除了小脑中几乎没有检测到CRH mRNA表达外,在其他区域均有表达且下丘脑的表达量最高。GnRH2 mRNA在所检测的组织中都有表达,进一步研究GnRH2在脑部不同区域的表达的发现,GnRH2 mRNA在脑部的不同区域都有表达,表达最高的是在下丘脑。在餐前餐后的试验中设置7个处理组,且每个处理组放养15尾鱼(体重为39.42±3.61g),将11：00作为0时每天进行喂食。喂养两周后,在喂食前3小时(8：00),喂食前1小时(10：00),喂食时(11：00),喂食后1小时(12：00)和喂食后3小时(14：00)取下丘脑进行试验,其中有两个组在0时不喂食作为禁食组。结果显示：在餐后的1小时和3小时喂食组与对禁食组相比,下丘脑MCH mRNA表达量显著下降(P<0.05)；CRH mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)；GnRH2 mRNA表达量在餐后1小时和3小时都显著增加(P<0.05)。长期禁食试验中设置喂食组和禁食组各3个重复,每个重复各20尾鱼(体重为36.75+4.12g),喂食组正常喂食,禁食组禁食7天,第9天按之前喂食方法进行复投喂直到14天。结果显示：在第1,3,5和7天时,禁食组与对照组相比,下丘脑MCH mRNA的表达量显著增加(P<0.05),而第9天复投喂组的MCH mRNA水平显著下降,到第14天时与喂食组相比没有显著差异(P>0.05)；在禁食的第7天,禁食组与对照组相比下丘脑CRH mRNA内的表达量显著降低(P<0.05),复投喂组的CRH mRNA水平与喂食组相比有显著增加(P<0.05),到第14天时,复投喂组CRH mRNA表达水平与喂食组一致；在禁食1,3,5和7天,禁食组与对照组相比下丘脑GnRH2 mRNA内的表达量显著降低(P<0.05),第9天复投喂后,复投喂组的GnRH2 mRNA水平显著升高,到第14天与喂食组相比无显著差异(P>0.05)。结论：1、在齐口裂腹鱼上首次克隆出了MCH、CRH和GnRH2基因的全长序列；2、MCH、CRH和GnRH2在大脑中表达量最高；3、不同的摄食水平平能够影响MCH、CRH和GnRH2 mRNA的表达量变化,说明三者都参与齐口裂腹鱼的摄食调节。其中,MCH在摄食调控中可能起促进摄食的作用,而CRH和GnRH2则可能是发挥抑制摄食的功能。