【摘 要】
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MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,应用于流感病毒的分离和疫苗制备。本文在DMEM/F121:1培养基的基础上,开发了适于MDCK细胞生长的廉价低血清培养基M-LSM(血清含量为2-3
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MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,应用于流感病毒的分离和疫苗制备。本文在DMEM/F121:1培养基的基础上,开发了适于MDCK细胞生长的廉价低血清培养基M-LSM(血清含量为2-3%),该培养基适于MDCK细胞静置培养和微载体悬浮培养。在T-25方瓶中培养MDCK细胞,接种密度为0.8×105cells/ml,132h达到最高细胞密度17.1×105cells/ml,扩增了21倍。MDCK细胞可以直接适应到低血清培养基中,并能稳定传代20次以上。在250ml转瓶中实现了微载体悬浮培养MDCK细胞,并连续传代4次,细胞生长速率未改变。在1.5L搅拌式生物反应器中使用3.5g/L微载体换液培养MDCK细胞,最高细胞密度达到37.2x105cells/ml。1.5L生物反应器微载体悬浮培养MDCK细胞48h,细胞密度可达到19.3×105cells/ml,经过消化反应器消化,将细胞转移至5L生物反应器中进行微载体悬浮培养,最高细胞密度可达36.7×105cells/ml。
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