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目的：腺病毒5型早期区A基因(early region 1A，E1A)是新近发现的一个具有抑癌作用的基因，E1A蛋白能够从正负两种途径调控多种基因的表达，具有诱导肿瘤细胞分化、逆转其恶性表型、降低其体内致瘤性和抗转移等活性，但E1A基因在结肠癌治疗的作用尚少见报道。聚乙烯亚胺(polyethylenimine，PEI)作为新型的非病毒载体已用于基因转染实验。本研究的目的是以自行合成的PEI纳米凝胶为载体转染E1A基因，并观察E1A基因对结肠癌细胞体外生长的抑制作用和对化疗药物及电离辐射的增敏效应，并初步探讨其的作用机理。
方法：经PEI介导，将真核细胞高效表达E1A基因的重组质粒psv-E1A导入人结肠癌细胞系SW480，RT-PCR证实其转染，G418筛选出阳性克隆细胞。通过测绘生长曲线和计算倍增时间，观察EIA基因对该细胞系生长的抑制作用。用MTT法测定转染E1A基因前后，顺铂、泰素、5-氟尿嘧啶、博来霉素和电离辐射对SW480细胞的效应，流式细胞术检测转染前后SW480细胞的细胞周期分布变化。
结果：
1．质粒psv-E1A测序结果与基因库E1A基因序列完全相符。
2．G418筛选出阳性克隆细胞。
3．RT-PCR结果显示PEI能转染质粒psv-E1A并有稳定的表达。
4．流式细胞仪测细胞周期，与SW480细胞相比，SW480-E1A细胞S期比例由56.06％降至38.78％，呈下降趋势(p<0.01)；G2/M期比例从3.86％增至28.06％，增加显著(p<0.01)；G1期细胞比例无显著变化(p>0.05)。
5．台盼蓝染色法测量SW480细胞及SW480-E1A细胞数量，计算出不同的倍增时间。转染E1A基因细胞群体生长缓慢，倍增时间延长(是未转染细胞的1．5倍)(p<0.01)。
6．转染E1A基因后，SW480-E1A细胞对顺铂、博来霉索、泰素和电离辐射的敏感性显著提高(p<0.01)，而对5-氟尿嘧啶的敏感性无明显变化(p>0.05)。
结论：PEI能转染质粒psv-E1A。E1A基因能够明显抑制入结肠癌细胞的生长，并明显提高其对顺铂、博来霉索及泰素等化疗药物和放射线的敏感性。其机制可能与E1A基因改变肿瘤细胞的增值状态和细胞周期时相有关。