采用新型分子表面印迹技术构建手性空穴实现对氨基酸对映体的识别与拆分研究

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本研究通过γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷的媒介,在溶液聚合体系中,采用“接出”(“graft from”)法将功能单体二甲基氨基甲基丙烯酸乙酯(DMAEMA)接枝于硅胶微粒表面,制得了功能接枝微粒PDMAEMA/SiO2,研究了该接枝微粒对天冬氨酸和谷氨酸的吸附行为,并以其为基质材料,分别制备了L-Asp和L-Glu分子表面印迹材料,采用静态法和动态法研究了印迹材料对天冬氨酸和谷氨酸对映体的识别拆分性能。本文的研究结果在氨基酸手性拆分技术领域具有重大突破,并具有良好的应用前景。用偶联剂γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(KH-570)对微米级硅胶进行了表面化学改性,并采用溶液聚合法,在改性硅胶微粒表面实施了甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(DMAEMA)的接枝聚合,制备了接枝微粒PDMAEMA/SiO2。采用红外光谱(FTIR)法、热失重法(TGA)及扫描电子显微镜(SEM)等方法,对微粒SiO2和接枝微粒PDMAEMA/SiO2进行了表征,考察了制备条件对DMAEMA的接枝聚合过程,结果表明,在接枝聚合过程中,适宜的反应条件为:单体浓度6%,引发剂用量1.2%,温度75℃,反应10h,在此适宜条件下,PDMAEMA的接枝度可达21.63g/100g。考察了吸附材料PDMAEMA/SiO2对天冬氨酸和谷氨酸的吸附行为,深入研究了吸附机理。研究结果表明,接枝大分子PDMAEMA的叔氨基团与氨基酸分子之间具有强的静电作用与氢键作用的两种作用的协同导致PDMAEMA/SiO2产生强的吸附作用,尤其对酸性氨基酸表现出很强的吸附能力,30℃下吸附容量分别可达62mg/g和68mg/g;当pH小于4.0时,随着pH的值高,吸附容量也随之上升,当pH大于4.0时,随着pH的升高,吸附容量降低;由于静电作用和氢键属于物理吸附,随着温度的升高,吸附容量下降;盐度对接枝微粒和氨基酸分子之间的吸附有屏蔽作用,随着盐度的升高,吸附容量下降;吸附容量随着接枝度增大随之增加。采用本课题组建立的新型分子表面印迹技术,以L-天冬氨酸和L-谷氨酸为模板离子,二氯乙醚为交联剂,对接枝在硅胶表面的PDMAEMA大分子链进行了分子印迹(MIP),分别制备了L-Asp和L-Glu表面印迹材料MIP-PDMAEMA/SiO2。分别以与D-Asp和D-Glu为对比物,采用静态与动态两种方法,考察研究了表面印迹材料MIP-PDMAEMA/SiO2对L-Asp和L-Glu的结合性能与分子识别特性。研究结果表明,分子表面印迹材料MIP-PDMAEMA/SiO2对L-Asp和L-Glu具有特异的识别选择性与优良的结合亲和性。印迹材料MIP-PDMAEMA/SiO2对L-Asp和L-Glu的识别选择性系数分别为3.24和3.30。此外,印迹材料MIP-PDMAEMA/SiO2还具有良好的洗脱性能,以稀NaOH溶液作为洗脱液,13个床体积内解吸率可达99.73%。交联温度及交联剂的用量对印迹材料的选择性系数也有一定的影响,适宜的温度为35℃,适宜的二氯乙醚的用量为其物质量与PDMAEMA链节量之比等于1:4。
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