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白癜风是一种常见的、获得性色素障碍性皮肤病,常对患者心理产生巨大负面影响。迄今为止,白癜风的脱色机制和复色机制尚未完全清楚。国内外研究发现,白癜风最主要的复色模式为毛囊周围复色模式,提示复色的黑素细胞可能来自毛囊。研究表明,人毛囊隆突区中存在神经嵴干细胞（neural crest stem cells,NCSCs）,经诱导可分化为黑素细胞,这提示NCSCs在白癜风毛囊周围复色的过程中可能起重要作用。本课题前期研究已证实人毛囊隆突区存在NCSCs。体外培养人毛囊时,NCSCs可从毛囊隆突区中迁出,且具有较强的增殖活性。迁出的NCSCs在诱导分化培养基中培养后,可定向分化为黑素细胞。黑素细胞谱系起源于NCSCs。胚胎发育过程中,NCSCs经背外侧及腹侧途径迁移过程中可分化为黑素细胞,黑素细胞迁移至毛囊隆突区并静止形成黑素细胞干细胞（melanocyte stem cells,MSCs）。下一个毛发周期开始时,MSCs可自我更新、迁移,并分化为成熟的黑素细胞产生黑色素。毛囊内存在黑素细胞储存库,是白癜风毛囊周围复色中黑素细胞的主要来源。白癜风复色需要通过紫外线和/或药物激活毛囊黑素细胞前体,其中最强有力的刺激是紫外线。在紫外线照射期间,黑素细胞前体增殖、迁移到毛囊间表皮并重新填充没有黑素细胞的表皮区域。DCT、C-KIT、TYR均为黑素细胞标志物,其中,DCT表达于毛囊隆突区至表皮的黑素细胞谱系;TYR为黑素细胞分化的标志,存在于成熟黑素细胞中。本研究采用FUE技术提取单个毛囊单位后植入裸鼠背部,对经紫外线照射后DCT及TYR在人毛囊的表达进行分析,旨在动物实验水平,证实紫外线刺激对毛囊隆突区黑素细胞群体的激活,进一步探寻白癜风毛囊周围复色机制,为紫外线治疗白癜风提供理论依据。目的1、构建人毛发毛囊单位裸鼠移植模型。2、观察308nm紫外线照射不同时间DCT及TYR在人毛囊各段的表达情况。方法1、收取我院毛发移植手术中FUE（毛囊单位提取技术）提取的毛囊单位,均取得患者同意,签署知情同意书。所取毛囊单位入选标准为:（1）年龄18～60岁,男女不限;（2）毛囊生长良好;（3）局部无色素性疾病,无器质性病变;排除标准:（1）除秃发外有其他毛发疾病者;（2）取材后毛囊不完整者。2、无菌环境下,FUE技术提取后枕部头皮毛囊并分离,使其成为包含单根毛发的毛囊单位。3、2%戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉裸鼠（4～6周BALB/c）后,用注射器针头于裸鼠背部戳孔,并植入事先制备好的完整毛囊单位,每只裸鼠背部共植入毛囊20根。植入时将毛干部分保留于表皮外,表皮外长度均为2mm,并观察裸鼠植入毛囊后毛发存活及生长情况。4、将成功植入人毛囊单位并正常存活的裸鼠随机分为2组,308nm紫外线照射组及对照组,每组3只。将各组3只裸鼠分别于光照第5天、第9天、第13天终止处理并分离毛囊。5、将分离好的毛囊进行固定、石蜡包埋、切片。在组织病理下将毛囊大致分为三段,毛囊漏斗区（皮脂腺导管以上的毛囊）、毛囊隆突区（皮脂腺导管和立毛肌附着点之间的毛囊）和毛球部（立毛肌附着点以下的毛囊）,采用免疫组化观察308nm紫外线照射不同时间点DCT和TYR在人毛囊各段的表达情况,并进行统计分析。结果1、人完整毛囊单位植入裸鼠后存活良好,仅少部分毛发脱落,少部分毛发出现折断。毛囊植入后第1周,毛发的存活率为90.83%,存活毛囊表皮外毛干长度平均增长（1.63±0.70）mm;毛囊植入后第2周,毛发的存活率为80.00%,存活毛囊表皮外毛干长度平均增长（2.89±1.31）mm。2、DCT与TYR在 308nm紫外线照射组及对照组毛囊内均有不同程度阳性表达,表现为细胞质中棕色颗粒。DCT阳性细胞定位毛囊漏斗区、隆突区及毛球部,TYR阳性细胞定位于毛囊漏斗区上部及毛球部。3、308nm紫外线照射组与对照组相比,同一时间点毛囊各段的DCT阳性细胞数量均高于对照组（①漏斗区DCT+:第5天[t=7.060,P=0.002],第9天[t=13.174,P＜0.05],第 13 天[t=13.885,P＜0.05];②隆突区 DCT+:第 5 天[t=5.830,P=0.004],第 9 天[t=8.144,P=0.001],第 13 天[t=7.308,P=0.002];③毛球部 DCT+:第 5 天[t=5.271,P=0.006],第 9 天[t=21.266,P＜0.05],第 13 天[t=6.576,P=0.003]）。4、308nm紫外线照射组与对照组相比,同一时间点毛囊各段的TYR阳性细胞数量均高于对照组（①漏斗区TYR+:第5天[t=7.194,P=0.002],第9天[t=7.465,P=0.002],第 13 天[t=9.901,P=0.001];②毛球部 TYR+:第 5 天[t=8.300,P=0.001],第 9 天[t=7.491,P=0.002],第 13 天[t=8.418,P=0.001]）。5、随308nm紫外线照射天数的增加,毛囊各段DCT阳性细胞数量均较前增加,毛囊漏斗区及毛球部的TYR阳性细胞数量也较前增加（①漏斗区DCT+:F=31.357,P=0.001;②漏斗区 TYR+:F=43.976,P＜0.05;③隆突区 DCT+:F=51.696,P＜0.05;④毛球部 DCT+:F=29.400,P=0.001;⑤毛球部 TYR+:F=27.860,P=0.001）。结论1、成功构建人毛发毛囊单位裸鼠移植模型。2、人毛囊存在黑素细胞储存库,且在308nm紫外线照射下,黑素细胞前体可增殖、迁移,并分化为成熟黑素细胞。