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目的：1.研究Twist基因在骨肉瘤组织的表达情况,探讨Twist对骨肉瘤患者诊断、预后的关系；2.通过沉默Twist基因表达,观察Twist基因对骨肉瘤细胞MG-63中EMT相关蛋白表达及细胞生物学行为能力的影响,分析Twist基因对骨肉瘤转移及EMT的作用和机制。方法：1.使用免疫组化方法检测107例骨肉瘤患者和25例骨纤维结构不良组织患者石蜡标本中Twist基因表达情况,结合患者临床资料分析Twist基因表达与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、病理亚型、复发、转移等临床特征之间的联系；2.使用免疫组化方法检测107例骨肉瘤患者石蜡标本中E钙粘蛋白基因表达情况,使用Spearman等级相关检验分析Twist基因表达与E钙粘蛋白表达的关系,使用Kaplan-Meier法和对数秩检验分析Twist基因表达与E钙粘蛋白表达与骨肉瘤患者生存率的关系,使用多因素Cox回归分析预测骨肉瘤患者预后风险因素；3.采用脂质体法在骨肉瘤细胞MG-63中转染特异性Twist siRNA,采用RT-PCR法和Western-blot法检测Twist mRNA和蛋白表达,筛选干扰效率最佳的siRNA;采用RT-PCR法和Western-blot法检测E钙粘蛋白、N钙粘蛋白、β-环连蛋白的mRNA和蛋白表达；采用MTT法检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡情况,采用Transwell小室迁移、侵袭实验检测细胞迁移能力和侵袭能力。结果：1.骨肉瘤标本中Twist阳性表达率为31.8%(34/107)显著性高于骨纤维结构不良标本中Twist阳性表达率8.0%(2/25),(X2=5.776,P<0.05)；在出现转移的骨肉瘤中Twist的表达阳性52.8%(28/53)高于无肿瘤转移的Twist表达阳性率11.1%(6/54),(X2=21.474,P<0.05)。2.骨肉瘤标本中E钙粘蛋白阳性表达率为20.6%(22/107)；E钙粘蛋白阳性表达与骨肉瘤病理亚型、转移临床特征相关(X2=0.046,P<0.05；X2=11.548,P<0.05)；E-钙粘蛋白表达与Twist表达在骨肉瘤标本中为负相关(rs=-0.209,P<0.05)；Twist表达阳性的骨肉瘤患者总体生存率和无病生存率比Twist表达阴性的骨肉瘤患者低(均P<0.05),E钙粘蛋白表达阴性的骨肉瘤患者总体生存率低于E钙粘蛋白表达阳性的骨肉瘤患者(P<0.05),E钙粘蛋白表达阴性的骨肉瘤患者与E钙粘蛋白表达阳性的骨肉瘤患者在无病生存率方面无显著性差异(P>0.05)；年龄和Twist表达是影响无病生存率和总体生存率的独立风险因素(均P<0.05)。3.三组Twist siRNA阳性组中Twist siRNA#806组沉默Twist基因效果最明显；利用RT-PCR和Western-bloting检测：E钙粘蛋白mRNA和蛋白的表达水平Twist siRNA#806组高于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)；N钙粘蛋白和β-环连蛋白的mRNA和蛋白的表达水平Twist siRNA#806组低于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)；4.在12h、24h、48h、72h时MTT结果显示Twist siRNA#806组细胞增殖明显低于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)；流式细胞术检测细胞周期结果显示Twist siRNA#806组细胞中在亚G0/G1期细胞所占比例高于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)；检测细胞凋亡结果显示Twist siRNA#806组凋亡细胞所占比例高于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)；Transwell细胞迁移和侵袭实验结果显示Twist siRNA#806组迁移细胞数低于Twist siRNA#NC组和空白组(P<0.05)。结论：1. Twist基因在骨肉瘤组织中高表达且与骨肉瘤出现转移密切相关；2. Twist和E-钙粘蛋白联合检测可以作为骨肉瘤预后检测指标,Twist是骨肉瘤患者预后判断的独立风险因素之一；3. Twist基因是骨肉瘤MG-63细胞发生EMT的关键调节因子,影响细胞生物学行为能力,可能是促进肿瘤转移机制之一,Twist基因可能成为潜在的骨肉瘤特异性治疗靶点。