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2005和2006年7-9月,从甘肃敦煌、玉门、嘉峪关、张掖、武威、白银、兰州、定西、甘南、陇南、天水、平凉、庆阳等地收集土样和葡萄45份,共分离野生酵母菌株146株(现保藏于山东轻工业学院食品与生物工程学院分子生物学实验室)。通过形态、生理生化、分子鉴定确定了这些菌株的分类地位,初步探明甘肃地区野生酵母菌的物种多样性,并分析了部分种内菌株间的遗传多样性,此外对一些菌株的发酵特性(耐高温、耐高渗、耐高糖及耐酒精)进行了评价,为工业菌种改良提供理论依据。主要实验结果如下:1.从146株野生酵母菌中选取有典型菌落特征的菌株84株,测定26S rDNA D1/D2区序列,与GenBank核酸序列数据库中模式菌株的同源相似率达99%以上有75株,即碱基差异率<1%,属于种内差别。采用DNA Star软件的MegAlign程序,基于Clustal W算法对84株供试菌株和近缘种模式菌株的26S rDNA D1/D2区序列匹配排列生成的系统发育树,结果显示亲缘关系与同源比较分析结果相吻合。2.对29株野生酵母菌进行了部分生理生化测试,发现个别菌株的个别性状与26S rDNA D1/D2区序列鉴定的模式种描述不完全符合。ITS区(包括ITS1、5.8S和ITS2)序列分析发现,ITS1区碱基变异较大,多数菌株的同源相似率低于99%,而ITS1区用作同种菌株之间亲缘关系的比较分析较为适宜,如白地霉。3.依据形态学、生理生化和分子鉴定的结果,以及酵母最新分类体系,将146株野生酵母菌株归为15个属32个种,其中中国新纪录种10个,Candida pseudolambica,Cryptococcus aerius,Hanseniaspora guilliermondii,Hanseniaspora occidentalis , Candida fermentati , Pichia galeiformis , Zygoascus hellenicus var. hellenicus,Trichosporon coremiiforme,Williopsis californica,Pichia pijperi;疑似新种1株,菌落黑褐色,湿润,与隐球酵母属亲缘关系较近,有待进一步确定其分类地位。4.对29株酵母进行了抗性评价。菌株38A(Candida tropicalis)耐60%的葡萄糖,耐45℃高温,耐14%NaCl,耐乙醇14%;葡萄糖发酵实验表明,该菌株起酵快,产酒度达8.5%(V/V),有潜在的应用价值。