目的:本课题组前期发现了一个LPL突变基因,拟在动物水平上研究该突变基因型和表型之间的关系,并对其发病的相关分子机制进行深入的研究,为突变基因造成的疾病提供精准的诊断,也为靶向基因治疗药物开发提供有力的依据。方法:提取小鼠的组织进行DNA检测,通过一代测序进行基因型的鉴定。区分野生型和突变型的小鼠,分组进行喂养。通过取小鼠的血清,检测小鼠基础糖脂代谢的指标。通过IPGTT实验观察小鼠糖耐量的表现,通过western blot检测突变对心肌和肝脏组织中bip和Akt的表达的影响,通过透射电镜观察突变对心肌和骨骼肌超微结构的影响。结果:通过一代测序鉴定小鼠的基因型,得到野生型和突变型的小鼠。与野生型小鼠相比,突变组小鼠的血清脂代谢指标无明显改变,而糖代谢指标出现了差异。突变组的血清胰岛素水平明显升高,IPGTT实验突变组的小鼠血糖升高更快,峰值也更高。同时我们通过油红o染色发现肝脏出现明显的脂质沉积。通过western blot发现,与野生型的小鼠相比,在心肌突变的小鼠内质网应激的标志性蛋白bip明显升高,而在肝脏中两组小鼠的bip表达无明显的差异,表明突变组发生了内质网应激。另外,在心肌组织中,与对照组小鼠相比突变组小鼠Akt的磷酸化水平明显降低,而总的Akt水平两组间无明显的差异。表明有胰岛素抵抗的发生。电镜下,心肌和骨骼肌出现线粒体的改变。结论:我们利用LPL致病突变基因敲入模型发现LPL C310R突变导致显著糖耐量异常,同时发现肝脏发生明显脂质沉积,这可能是导致糖耐量异常的主要原因。同时我们发现LPL突变引起心肌内质网应激和胰岛素抵抗,加剧心肌代谢异常LPL突变可能产生蛋白毒性,从而引起内质网应激和胰岛素抵抗,进而影响整个机体糖脂代谢紊乱。