背景我国逐渐步入老龄化社会,脑血管疾病的发病率日益增加,已成为危害中老年人身体健康的主要疾病之一。脑血管病以高致残率、高死亡率、高复发率的特点,给家庭及社会带来了沉重的负担,同时给患者的身心健康带来了严重的影响。脑卒中分为缺血性卒中和出血性卒中,其中缺血性卒中(cerebral inschemic stroke, CIS)称为脑梗塞(cerebral infarction, CI),占到了脑卒中总量的60%-80%。对于脑缺血损伤机制、有效预防措施和治疗药物的研究,一直是广大临床及科研人员的研究重点。目前大量实验表明重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulony stimulating factor, rhG-CSF),具有脑保护作用。但其机制尚未完全明确,可能与其抗凋亡、动员骨髓干细胞进入脑缺血受损区域分化为神经细胞,促进血管生成,抑制炎症反应,促进神经营养因子释放等作用有关。自噬(Autophagy)即自我吞噬(self-eating),此过程可将细胞内某些病毒、病原体及错误折叠而形成的凝聚蛋白或受损的细胞器降解清除。这对于维持机体正常功能具有重要意义。血液系统及心血管系统的研究已证实,重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulony stimulating factor, rhG-CSF)可参与调节自噬,从而在血液细胞分化及减轻心肌缺血损伤中发挥作用。那么分子伴侣介导自噬是否在脑缺血损伤中发挥作用,这是本实验的研究重点。目的已有文献报道rhG-CSF对脑缺血有保护作用,但其作用机制尚未完全明确。本研究将从细胞实验水平及动物实验水平两方面来初步探讨rhG-CSF与分子伴侣介导自噬(chaperone-mediated autophagy, CMA)的关系,从而进一步明确rhG-CSF的脑缺血保护作用机制,为rhG-CSF的临床应用提供更多的理论依据。方法制备SH-SY5Y细胞缺氧模型,给予不同剂量rhG-CSF孵育。Western blot检测各组LAMP-2a及HSC-70的表达,细胞免疫荧光检测各组HSC-70表达。将54只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、对照组、实验组,每组18只。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。实验组给予rhG-CSF注射5天(50ug/kg·d),对照组给予等量生理盐水注射5天。使用改良神经功能缺损评分表(modified neurological severity score,mNSS)对三组大鼠进行神经功能评分。Western blot及免疫组化法分别检测各组LAMP-2a、HSC-70及MAP-2的表达。结果细胞实验结果显示,rhG-CSF可上调细胞缺氧模型中HSC-70及LAMP-2a的表达且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(p<0.05)。动物实验结果显示,与假手术组相比,对照组及实验组LAMP-2a、HSC-70表达上调,差异有统计学意义(p＜0.05)；与对照组相比,实验组LAMP-2a、HSC-70表达上调,差异有统计学意义(p<0.05)。与假手术组相比,对照组及实验组脑缺血灶周边区脑组织MAP-2表达增加；与对照组相比,实验组脑缺血灶周边区脑组织MAP-2表达增加。使用mNSS评分表进行神经功能评分。与假手术组相比,对照组及实验组大鼠神经功能评分明显高于假手术组(p<0.05)；与对照组相比,实验组大鼠神经功能评分明显低于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论rhG-CSF对于脑缺血损伤具有保护作用,这种保护作用可能通过上调分子伴侣介导自噬而发挥。