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金钱松Pseudolarix kaempferi Gord.为我国特有单属种、孑遗植物，目前，处于濒危状态，被列为国家二级保护植物，是传统中药，含有二萜类、三萜类、三萜内酯及甾醇类等成份，具有强烈的抗真菌、抗肿瘤作用。
植物内生真菌能产生大量新的天然产物，有些内生真菌还可以产生与宿主植物相同或相近的代谢产物，已成为天然产物潜在的重要资源。本文以江苏大学生药学研究所保存的18株具有抑菌，杀菌活性的金钱松内生真菌为研究对象，按照WHO的室内筛选杀螺药物标准方法，寻找出对钉螺有致死作用的内生真菌；同时也研究了金钱松原植物的杀螺活性。金钱松内生真菌JJ18具有显著的杀钉螺活性，对其进行了杀螺活性物质与菌株鉴定、水生生物毒性，培养基条件的优化等相关研究。本研究旨在探索从金钱松内生真菌与原植物中发现杀螺活性成分的可能性，为研究新的天然产物杀螺药物提供思路。主要研究内容如下：
1.从金钱松的18株内生真菌中筛选出了对钉螺有致死作用的菌株。按照WHO的杀螺剂浸泡试验法观察内生真菌发酵液杀螺效。其中JJ18菌株发酵液调节中和液(pH=7)有较高的杀螺效果，24h达26.7％，48h达76.7％，72h达100.0％。JJ18菌株发酵液浓度为5％时，杀螺率为53.3％，浓度10％时，杀螺率为86.7％，且对鱼无急性毒性。
2.研究了金钱松内生真菌JJ18的杀螺作用、活性部位及该菌株杀螺活性的传代稳定性，从而探索其应用的可能性。JJ18菌株发酵液的活性成分集中在胞外液，当胞外液浓度10％时，72h杀螺率接近90％，且发酵外液成盐后有良好的耐热性，强光照下7天内活性物质基本不改变，菌株传代稳定，杀螺活性成分集中在正丁醇萃取部位，通过ELISA鉴定JJ18发酵液乙醇提取物中含有真菌毒素赭曲霉素A(OTA)。
3.研究了JJ18发酵液醇提物杀螺活性和对湖北钉螺糖原和总蛋白的生理生化影响。观察不同浓度下JJ18发酵液提取物灭螺效果，采用葸酮显色法测定处理后钉螺软体的糖原含量变化，凯氏定氮法测定其蛋白质含量。结果JJ18菌株发酵液醇提物灭螺效果显著，试验浓度400mg/L作用3天后灭螺率达到100％，与1mg/L氯硝柳胺溶液处理2～3d的灭螺效果相当；经统计分析：72h灭螺的LC50和LC90浓度分别是145.0mg/L和311.9mg/L。JJ18发酵液提取物处理后钉螺软体的糖原含量显著下降，减少幅度从10.42％到28.03％：蛋白质含量的变化不明显。
4.对JJ18进行了菌株鉴定。采用形态学与分子生物学相结合的方法。通过形态学鉴定判断JJ18属于曲霉属。经核糖体rDNA ITS区序列分析，JJ18与黑曲霉(Aspergillus niger)属中的各菌株具有极高的同源性(＞96％)，从基于rDNA-ITS部分序列重建的系统进化树可以看出，同属的rDNA-ITS序列被聚在一个分支中，通过核糖体rDNA ITS区测序发现，该菌株序列与属于Aspergillusniger的多条序列相似程度较高，且差异均在ITS1和ITS2区，属于可变区。据此我们鉴定该菌株属于黑曲霉(Aspergillus niger)，GenBank登录号为：EF660198。
5.国内首次运用了卤虫模型评价杀螺药物的水生生物毒性。内生真菌JJ18醇提物具有显著的杀虫活性，24h后，50mg/L、100mg/L和200mg/L杀虫率分别达到82.2％，80.7％和96.5％。48h后，高于50mg/L杀虫率均可达到100.0％。24h时LC50:18.37mg/L(95％置信区间4.65-43.02mg/L)可知其对敏感的水生生物具有毒性。
6.通过改进发酵工艺提高了金钱松内生真菌JJ18的杀螺活性。采用单因素和正交试验对发酵培养基及发酵条件进行优化。按照WHO的杀螺剂浸泡试验法，以杀螺率为主要优化指标，同时考察发酵液的生物量，对金钱松内生真菌JJ18发酵条件进行优化。以马铃薯175g/L氮源，初始pH6.0，葡萄糖和蔗糖15g/L为碳源，磷酸二氢钾0.5mmol/L为代谢调节因子，接种量2％，250mL三角瓶装液量50mL，温度30℃，120rpm，发酵7天，杀螺活性最高提高16.7％。生物量与杀螺率存在一定的相关性。
7.研究了金钱松树皮（土荆皮）的杀螺效果。土荆皮具有较强的灭螺效果，石油醚相活性最强200mg/L作用48h后，活性可达100％，经浓度梯度试验，96h时LC50:20.01mg/L和LC90:40.19mg/L。经GC-MS分析，推测其活性化合物为雪松醇。