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本研究以鲁西黄牛和荷斯坦奶牛为研究对象，研究与奶牛热应激相关的HSP70基因3-侧翼区的单链核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)及其与产奶性状这间的关系。
1、设计一对引物，扩增HSP70基因3-侧翼区3274-3773bp处，采用PCR-SSCP技术分析所得到扩增片段的SNPs。用最小二乘法分析SNPs与泌乳性状的关系。结果表明:
(1)72头鲁西黄牛和601头荷斯坦奶牛的PCR产物经SSCP检测均发现三种基因型，分别为AA、AB和BB型。通过测序发现HSP70基因的3-侧翼区在3494位点发生1个新的突变，由T突变为C，导致HSP70基因3-侧翼区产生多态性。鲁西黄牛的AA、AB、BB基因型频率分别为1.39％、48.61％、50％。荷斯坦奶牛的AA、AB、BB基因型频率分别为72.71％、24.79％、2.5％。经过x2适合性检验，荷斯坦牛在该位点的x2值为0.2895(p＞0.05)，说明该群体在此位点的突变达到Hardy-Weinberg平衡。
(2)研究表明，BB基因型的荷斯坦奶牛个体，乳脂率、乳蛋白章、305d产奶量相对于从基因型的个体都要高;红细胞钾含量和产奶量下降率比AA类型的个体要低，且达显著水平(p＜0.05)。鲁西黄牛B基因的基因频率为74.31％，而荷斯坦奶牛B基因的基因频率却比较低，为14.89％。由于鲁西黄牛的耐热性显著强于荷斯坦奶牛，且耐热性最高的BB型奶牛产奶量下降率显著低于耐热性差的AA型奶牛。因此等位基因B可作为选育抗热应激奶牛的潜在的分子遗传标记。
2、设计一对引物，扩增HSP70基因3-侧翼区6244-6742bp处，采用PCR-SSCP技术分析所得到扩增片段的SNPs。用最小二乘法分析SNPs与泌乳性状的关系。结果表明:
(1)541头荷斯坦奶牛的PCR产物经SSCP检测发现六种基因型，分别为AA、AB、BB、AC、BC和CC型。通过测序发现HSP70基因的3-侧翼区的第6400bp、6600bp和6601bp处分别发生了G/C、C/T和G/A突变。经过x2适合性检验，荷斯坦牛在该位点的x2值为14.59(p＜0.01)，说明Hardy-Weinberg平衡检验不处于平衡状态。
(2)分析表明，BB基因型的荷斯坦奶牛，305d产奶量相对于AB、BC、AA、AC和CC基因型的个体都要高，且与AA、CC和AC类型相比达到显著水平(p＜0.05)，上述结果显示在我们所研究的荷斯坦奶牛群体中，B基因在产奶量方面为有利等位基因;BB基因型红细胞钾含量和产奶量下降率比AB、BC、AA、AC和CC基因型都要低，且BB基因型与从、CC和AC型相比红细胞钾含量差异达显著水平(p＜0.05)。根据荷斯坦奶牛不同基因型红细胞钾和产奶量下降率的差异，可推断B等位基因应该是抗热基因，A和C基因为非抗热基因。