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目的:结肠癌作为常见的消化道恶性肿瘤,在我国的发病率和死亡率均呈逐年上升趋势。结肠癌由于术后易复发,放化疗耐受等特点,目前临床上的治疗效果都不理想。因此,需要探索出新的结肠癌治疗策略。肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)是肿瘤组织中存在的较少的具有自我更新能力并能无限增殖、多向分化并对放化疗不敏感的细胞亚群,与肿瘤的发生、发展和各种生物学抗性密切相关。肿瘤干细胞理论的提出使人们认识到,以肿瘤干细胞为靶点的抗肿瘤治疗策略为彻底治愈肿瘤带来了可能。树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前已知的生物体内功能最强的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC),能够特异性地诱导机体免疫应答的发生。PD-L1作为负性免疫共刺激分子在肿瘤免疫逃逸过程中起到重要作用,抗PD-L1单抗能与肿瘤微环境中表达的PD-L1相结合,减弱PD-L1介导的免疫逃逸作用,从而增强DC疫苗介导的的免疫治疗效果。因此,本实验以CD44作为分选标志物,从小鼠结肠癌细胞系CT-26分选出CD44+细胞作为小鼠肿瘤干细胞,拟将CD44+CT-26细胞完全抗原致敏的DC疫苗与抗PD-L1单抗联用,探讨这种联合治疗策略能否有效地治疗小鼠结肠癌,为结肠癌靶向治疗提供实验依据。方法:免疫磁珠法分选获得CD44+CT-26细胞,用含20 ng/ml EGF、20 ng/ml b FGF、2%B27的DMEM/F12无血清肿瘤干细胞培养基培养;从小鼠骨髓中获得DC,将CT-26细胞裂解物和CD44+CT-26细胞裂解物分别作为抗原负载DC,获得DCCT-26和DCSC疫苗;然后,分别与抗PD-L1单抗联用,进行结肠癌荷瘤小鼠免疫治疗实验。分析小鼠的生存状态,肿瘤生长情况,小鼠脾来源T细胞对结肠癌细胞的杀伤作用。结果:(1)与Control组和αPD-L1组相比,DCSC+αPD-L1组小鼠的肿瘤生长显著受到抑制(P<0.05);肿瘤重量显著减小(P<0.05);小鼠脾来源CTL对CT-26细胞的杀伤显著增强(P<0.05)。(2)与DCSC组相比,除小鼠脾来源CTL对CT-26细胞的杀伤显著增强(P<0.05)外,DCSC+αPD-L1组与DCSC组其他指标无显著性差异。(3)与DCCT-26组相比,除小鼠肿瘤重量显著减小(P<0.05)外,DCSC组与DCCT-26组其他指标无显著性差异。(4)与DCCT-26+αPD-L1组相比,DCSC+αPD-L1组与DCCT-26+αPD-L1组其他指标无显著性差异。结论:在BALB/c小鼠结肠癌模型中,CD44+CT26细胞完全抗原负载的DC疫苗与抗PD-L1单抗联用可以产生有效地抗肿瘤免疫治疗效果,抑制肿瘤生长,增强对肿瘤细胞的杀伤效果。但是与肿瘤细胞抗原致敏的DC疫苗相比,抗肿瘤免疫治疗优势不明显。