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目的:观察艾灸及艾烟对AD小鼠学习记忆能力、特征性病理产物及氧化应激的影响,并基于mTOR信号通路探讨艾灸及艾烟抗AD的作用机制。方法:36只APP/PS1双转基因小鼠随机分为3组:常规艾灸组,艾烟组,模型组。将12只C57BL/6小鼠作为空白组。空白组及模型组小鼠每日放入固定器中,于室内空气中暴露;艾灸组小鼠每日放入固定器后,在关元穴处施灸;艾烟组小鼠每日放入固定器后,暴露于10-15mg/m3的艾烟环境,所有干预均为15min/天,6天/周,连续干预8周。于实验第9周开始进行开场实验、新物体识别实验、避暗实验及Morris水迷宫实验;行为学实验结束后,牺牲小鼠取材,采用免疫组化法测Aβ 1-42的表达;硫磺素S法测老年斑的总面积及斑块负荷;酶标法测定GSH含量,羟胺法测定SOD活力,硫代巴比妥酸法测 MDA 含量;Western blot 法测 p-tau(Ser202/Thr231)/tau、p-mTOR/mTOR、PI3K、p-AMPKα/AMPKα、PGC1α、p-4E-BP1/4E-BP1、p-p70S6K/p70S6 K、p-ULK、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平;RT-PCR法检测mTOR、Akt、AMPKα1的mRNA表达。结果:1.行为学结果开场实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠直立次数增加(p=0.048),艾烟组小鼠水平活动的距离(p=0.047)、穿越中央区的次数(p=0.014)均增加;新物体探索实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠对新物体探索时间显著加长(p=0.012),艾烟组小鼠对新物体探索次数显著增多(p=0.019);在避暗实验中,与模型组相比,艾灸组小鼠(p=0.039)及艾烟组(p=0.000)小鼠的训练期犯错次数均显著降低;水迷宫定向航行实验中,随着训练天数的增多,各组小鼠潜伏期逐渐缩短。与模型组相比,测试第4d,艾灸组潜伏期明显低于模型组(p=0.006)。2.Aβ沉淀及tau蛋白磷酸化通过免疫组化检测发现,模型组Aβ 1-42的表达明显增多,海马CA1区及CA3区可见较多棕色沉淀斑块,艾灸组及艾烟组海马CA1区及CA3区偶见斑块且斑块面积较小;硫磺素S染色法测老年斑,与模型组相比,艾灸组斑块计数显著减少(p=0.025),艾灸组(p=0.008)及艾烟组(p=0.039)斑块负荷显著减少;Western blot法测tau蛋白磷酸化,与模型组相比,艾灸组海马p-tau(Thr231)显著降低(p=0.04)。3.脑组织氧化应激状态模型组小鼠脑组织SOD活力较空白组显著降低(p=0.000),MDA含量较空白组显著升高(p=0.000);与模型组相比,艾灸组小鼠脑组织GSH含量显著增高(p=0.002),SOD活力显著提高(p=0.02),MDA含量显著降低(p=0.009);艾烟组MDA含量显著降低(p=0.037)。4.mTOR上游信号通路模型组小鼠海马mTOR、p-mTOR、p-Akt/Akt较空白组显著升高(p<0.05),p-AMPKα、p-AMPKα/AMPKα较空白组显著降低(p<0.05);与模型组相比,艾灸组mTOR(p=0.029)、p-mTOR(p=0.005)、p-mTOR/mTOR(p=0.015)、p-Akt/Akt(p=0.002)均显著降低,p-AMPKα(p=0.049)、p-AMPKα/AMPKα(p=0.034)均显著升高;与模型组相比,艾烟组 mTOR(p=0.018)、p-mTOR(p=0.002)、p-Akt/Akt(p=0.029)均显著升高;mTOR的mRNA表达量模型组显著低于空白组(p=0.000),AMPKα1的mRNA表达量模型组显著高于空白组(p=0.014)。艾灸组AMPKα1的mRNA表达量较模型组显著降低(p=0.001)。5.mTOR下游信号分子各组小鼠海马4E-BP1、p-4E-BP1的表达均无明显差别;模型组小鼠海马p-p70S6K /p70S6K(p=0.001)、p-ULK(p=0.028)表达较空白组显著升高;与模型组相比,艾灸组p-p70S6K/p70S6K的比值显著降低(p=0.003),LC3-Ⅱ的表达量显著增高(p=0.034);艾烟组p-p70S6K/p70S6K的比值较模型组显著降低(p=0.006)。结论:1.艾灸与艾烟抗AD的效应有所不同,艾灸可有效改善AD模型小鼠学习记忆障碍,减少Aβ沉积及tau蛋白磷酸化;艾烟干预对模型小鼠学习记忆的改善作用不及艾灸干预,但艾烟干预可有效改善AD模型小鼠情绪相关的行为学异常,减少老年斑沉积。2.艾灸可能是通过抑制Akt活化,激活AMPKα,进而抑制mTOR,调节蛋白质翻译,增强自噬,减少Aβ及tau蛋白的生成,增强Aβ及磷酸化tau蛋白的清除,以延缓AD的发生发展。3.艾烟可能是通过抑制Akt活化,降低mTOR磷酸化水平,抑制p70S6K信号分子活化,抑制Aβ的积聚,减少老年斑的生成,来延缓AD的发生发展。