玉米蛋白粉的降解及玉米小分子肽的初步研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangqiang1818
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玉米蛋白粉是一种丰富的蛋白质资源,可以开发多种氨基酸、小肽、饲料、培养基等衍生产品。本论文以玉米蛋白粉为唯一碳源和氮源设计玉米蛋白粉筛选培养基,筛选玉米蛋白粉降解菌,以深入研究研制玉米蛋白粉延伸产品。所获结果如下:1、以玉米蛋白粉为唯一碳源和氮源设计玉米蛋白粉筛选培养基,筛选玉米蛋白粉降解菌300多株,经摇瓶发酵复筛,获得降解效果较好的菌株L289,该菌株液体发酵游离氨基酸含量最高达1438.80μg/mL。经形态鉴定和ITS序列分析,该菌株为黑曲霉属,因此,该菌株命名为Aspergillus Niger L289。2、以黑曲霉L289(Aspergillus Niger L289)为玉米蛋白粉降解菌,经单因素和正交试验液体发酵测定分析,黑曲霉L289最适合培养基配方为:玉米蛋白粉4.0%,CaCl20.05%,培养基初始pH 7.0;最优发酵条件为:发酵温度34℃,摇床转速为150 rpm,发酵时间4 d,在250 mL三角瓶中水解玉米蛋白粉时装液量为60 mL,不添加任何碳源。此条件下发酵获得游离氨基酸达2407.63μg/mL。3、比较分析市售酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉与黑曲霉L289发酵降解为玉米蛋白粉的产物,经薄层色色谱鉴定,这些产物具有共同的游离氨基酸,它们分别是亮氨酸,缬氨酸,谷氨酸,丙氨酸,其中谷氨酸量最大,缬氨酸次之,丙氨酸第三,缬氨酸第四;同时有明显的拖尾斑点疑似是小分子肽。不同的是,黑曲霉L289分解产物,Rf值在0.33-0.66处斑点颜色较浅,游离氨基酸含量少;Rf值在0-0.33些斑点颜色很深,疑似为小分子肽,这是黑曲霉L289发酵产物突出的特点。4、经盐酸水解分析黑曲霉L289的主要疑似小分子肽,再经薄层色谱定性分析表明:小肽的氨基酸组成可能为成苯丙氨酸,缬氨酸,谷氨酸。
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