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目的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)是儿童及成人社区获得性呼吸道感染的最常见病原体。但由于缺乏特征性的临床表现及检测方法,这一感染的病原学诊断仍很困难。血清学及培养法耗时、不敏感、并缺乏特异性。为了增强这一感染源的检测,发展了nested PCR方法。本文采用nested PCR方法,扩增具有种属特异性的16SrRNA基因,试图建立一种敏感性高,特异性强的肺炎支原体的检测方法。方法1、收集240例可疑为肺炎支原体引起的肺炎患儿的咽拭子。2、提取DNA。3、以16SrRNA为靶基因,设计2套引物,进行nested PCR扩增。4、电泳观察结果。5、统计分析。结果1、nested PCR法与微量颗粒凝集法相比,在检测肺炎支原体上具有早期诊断的特点,且两种检测方法无显著性差异。2、nested PCR法的临床指标评价:准确度为82.1%;敏感度为76.5%;特异度为86.2%;阳性预测值为80.4%;阴性预测值为83.2%。3、nested PCR法比传统的PCR法检测肺炎支原体具有更高的敏感性。4、nested PCR法检测肺炎支原体,在各年龄组之间无差异,在7-9岁间出现高峰。结论1、nested PCR法是一种快速而特异的检测临床标本中肺炎支原体的可靠方法。2、nested PCR法扩增16SrRNA基因可以作为临床肺炎支原体感染的一种早期检测方法,指导临床治疗。