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蜘蛛毒素作为天然药物的一个新的重要来源,有着广阔的研究前景。利用蜘蛛毒素可以治疗癌症、癫痫等疾病。本文比较了雷氏大疣蛛毒素、敬钊缨毛蛛毒素、虎纹单柄蛛毒素、海南单柄蛛毒素的体外溶纤活性,并对毒素进行了分离纯化。首先利用纤维蛋白平板法检测四种蜘蛛毒素中除海南单柄蛛外都具有溶纤活性,比活力的测定表明雷氏大疣蛛的溶纤活性最强。性质实验说明蜘蛛毒素溶纤活性在37℃,弱酸性时最强；雷氏大疣蛛毒素对新鲜鸡血凝块的溶解作用较100IU的尿激酶要强；随着雷氏大疣蛛毒素溶液浓度的增加,溶解人血凝块的作用逐渐增强。利用反相层析分离具有体外溶纤活性的三种蜘蛛毒素,从雷氏大疣蛛毒素中分离得到了14个组分,其中4个具有溶纤活性；虎纹单柄蛛分离得了11个组分,其中1个具有溶纤活性；敬钊缨毛蛛分离得了22个组分,其中9个具有溶纤活性。雷氏大疣蛛毒素的组分2、组分10蛋白含量高,其余毒素的分离组分蛋白含量较低。另外,雷氏大疣蛛毒素的溶纤比活力高于其余两种蜘蛛毒素。因此,选择雷氏大疣蛛毒素的分离组分2、组分10(简称为RATX-2、RATX-10)再进行进一步的分离。二次分离采用阳离子交换法,RATX-2、RATX-10各收集了2个组分,其中RATX-2-2和RATX-10-2具有溶纤活性,SDS电泳显示单一条带,达到了电泳纯。通过比较反相层析和离子交换分离先后的不同,优化了蜘蛛毒素的分离方法。先采用阳离子交换的方法,比较了3种pH条件对分离效果的影响,结果表明pH6.0时阳离子交换效果最好,将阳离子交换所得组分再用反相层析分离,因离子交换洗脱组分盐浓度过高,造成分离效果不是很好；若先采用反相层析的方法,再采用阳离子交换的方法,则分离效果很好。本文采用先进的反相层析分离技术对雷氏大疣蛛毒素进行分离纯化。反相层析具有快速、高效和比较高的回收率等特点,所以在分离和制备上有它独特的优越性。国内外在蜘蛛毒液的分离纯化上大多采用这种方式。本研究采用反相层析与离子交换结合的方法,使得蜘蛛毒素得到较好的分离效果。