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研究目的:通过观察葱白不同活性成分对AS大鼠动脉血管壁组织形态、抗氧化、抗炎、血脂调节作用的差异性研究,明确葱白不同活性成分的作用,探讨辛温通阳中药葱白对大鼠动脉粥样硬化的治疗作用及机制,初步揭示辛温通阳法防治AS的物质基础。研究方法:选取体重为200±20克雄性SD大鼠70只,按体重排序随机分为正常组、模型组、葱白提取物组、葱白挥发油组、葱白黄酮组、葱白甾体皂苷组、葱白脂肪酸组,每组10只。制备动脉粥样硬化模型。适应性喂养一周后,正常组行假手术,其余各组行大鼠主动脉内膜球囊损伤术。正常组喂基础饲料和普通自来水,模型组及各治疗组给予高脂饲料(4%胆固醇、0.5%胆酸钠、10%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶和94.3%的基础饲料),并于实验开始时于右下肢肌肉注射维生素D3针剂(3×105u/㎏体重),以后每隔30天重复注射一次。手术后第3天开始给药,给药体积为2ml/㎏,正常组和模型组给予生理盐水。葱白提取物组按60mg/100g给药,葱白挥发油组6mg/100g(按挥发油占葱白提取物10%计算)、葱白黄酮组0.6mg/100g(按黄酮占葱白提取物1%计算)、葱白甾体皂苷组15mg/100g(按甾体皂苷占葱白提取物25%计算)、葱白脂肪酸组9mg/100g(按脂肪酸占葱白提取物15%计算),;每日1次,连续给药16周。于实验16周末禁食16h后,麻醉动物,腹主动脉取血分离血清,保存在-80℃低温冰箱备用。于实验16周末禁食16h后,麻醉动物,在主动脉弓起始段取1cm主动脉标本,10%多聚甲醛溶液固定12小时;打开腹腔,分离血管外脂肪组织,沿主动脉背部正中线剪开,生理盐水冲洗,-80℃低温冰箱保存备用。通过HE染色、油红O染色病理变化和病变成分。检测血清中总胆固醇(total cholestero,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density cholesterol lipopmtein,LDL-C)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、丙二醛(malondialolehyde,MDA)、超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)含量。用ELISA法检测血清IL-6水平。用实时荧光定量PCR技术检测PPARγm RNA、CXCL-16在腹主动脉上的表达。结果:1.HE染色显示颈总动脉病理改变正常组管腔呈圆形,中膜、内膜及外膜分界清晰,管腔由单层内皮细胞覆盖,结构完整,内弹力板连续无断裂,内膜及中膜没有增生,未见炎性细胞浸润;模型组:中膜及外膜分界不清,中膜增生明显,内膜增厚,不光滑,内皮细胞损伤脱落且连续缺失,可见斑块突出管腔,斑块内含有大量的巨噬细胞,平滑肌细胞和胶原含量相对较少;葱白提取物组内膜增厚程度相对较轻,内皮细胞排列较整齐,弹力膜连续无断裂,斑块亦无破裂;葱白甾体皂苷组中膜、葱白挥发油组增生相对较轻,内皮细胞排列相对整齐,弹力膜可见断裂,亦见斑块破裂;、葱白黄酮组、葱白脂肪酸组提取物组见胶原增生明显,中膜增厚,结构不清晰,内皮细胞损伤脱落。2.油红O染色观测腹主动脉脂质沉积情况正常组未见明显脂滴,模型组脂肪含量显著增加;葱白提取物组脂肪、葱白甾体皂苷组葱白脂肪酸组脂肪含量显著降低,葱白黄酮组、葱白挥发油组脂肪含量显著增加。3.对TG和TC的影响与正常组比较,模型组大鼠TC、TG明显升高(P<0.01);与模型组比较,葱白提取物组TG降低(P<0.05),TC显著降低(P<0.01);与模型组比较葱白甾体皂苷组TG降低(P<0.05)。与模型组比较葱白挥发油组TC显著降低(P<0.01)。与模型组比较,葱白脂肪酸组、葱白黄酮组TC、TG均无统计学差异(P>0.05)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组TG无统计学差异(P>0.05)。与葱白提取物比较,葱白挥发油组TC无统计学差异(P>0.05)。4.对HDL-C和LDL-C的影响与正常组比较,模型组大鼠HDL-C水平降低(P<0.05),LDL-C水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,葱白提取物组HDL-C水平升高(P<0.05),LDL-C水平明显降低(P<0.01);与模型组比较葱白甾体皂苷组HDL-C升高(P<0.05)。与模型组比较葱白脂肪酸组LDL-C显著降低(P<0.01),与模型组比较,葱白挥发油组、葱白黄酮组HDL-C、LDL-C水平均无统计学差异(P>0.05)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组HDL-C水平无统计学差异(P>0.05)。与葱白提取物比较,葱白脂肪酸组LDL-C水平无统计学差异(P>0.05)。5.对AS大鼠腹主动脉PPARγm RNA表达的影响与正常组比较,模型组腹主动脉PPARγm RNA表达明显降低;与模型组比较,葱白提取物组及葱白甾体皂苷组腹主动脉PPARγm RNA表达升高。各组基因扩增倍数的变化为:葱白提取物组:1.81;葱白甾体皂苷组1.87;葱白黄酮组0.59;葱白脂肪酸组:0.50;葱白挥发油组:0.55;模型组:0.576.对AS大鼠血清T-AOC的影响与模型组比较,葱白提取物组、葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。葱白甾体皂苷组作用优于葱白黄酮组(P<0.05)。7.对AS大鼠血清SOD的影响与模型组比较,葱白提取物组、葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。葱白甾体皂苷组作用明显优于葱白黄酮组(P<0.01)。8.对AS大鼠血清MDA的影响与空白模型组比较,葱白提取物组、葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。葱白甾体皂苷组作用与葱白黄酮组无统计学差异(P>0.05)。9.对AS大鼠各组血清IL-6的影响与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6水平升高(P<0.05),与模型组比较,葱白提取物组及葱白甾体皂苷组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组有显著差异(P<0.01)。10.对AS大鼠腹主动脉CXCL-16表达的影响与正常组比较,模型组腹主动脉CXCL-16表达明显升高;与模型组比较,葱白提取物组及葱白甾体皂苷组腹主动脉CXCL-16表达降低。各组基因扩增倍数的变化为:葱白提取物组:0.78;葱白甾体皂苷组0.49;葱白黄酮组1.06;葱白脂肪酸组:1.26;葱白挥发油组:1.19;模型组:1.49。11.对AS大鼠血清NO的影响与模型组比较,葱白提取物组、葱白挥发油组、葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白挥发油组无统计学差异(P>0.05)。12.对AS大鼠血浆H2S的影响与模型组比较,葱白提取物组、葱白葱白挥发油组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异(P<0.01)。与葱白提取物比较,葱白挥发油组无统计学差异(P>0.05)。结论:1.葱白提取物可减轻AS血管内膜病理损伤的作用最好,减少血管壁脂质沉积。2.葱白提取物组有升高HDL-C,降低TC、TG和LDL-C的作用;葱白甾体皂苷具有升高HDL-C,降低TG的作用。葱白挥发油有降低TC的作用。葱白脂肪酸有降低LDL-C的作用。葱白提取物及葱白甾体皂苷可升高PPARγm RNA在腹主动脉上的表达。3.葱白提取物能降低血清中MDA、升高SOD及T-AOC水平,葱白甾体皂苷及葱白黄酮均可降低血清中MDA、升高SOD及T-AOC水平但作用均弱于葱白提取物。4.葱白提取物及葱白甾体皂苷可显著降低血清IL-6水平,葱白提取物及葱白甾体皂苷可降低CXCL16在腹主动脉上的表达。5.葱白提取物组、葱白挥发油组、葱白甾体皂苷组及葱白黄酮组有显著差异可显著提高血清NO水平,葱白提取物组、葱白挥发油组可显著提高血浆H2S水平。6.葱白提取物的通阳作用是葱白挥发油、葱白黄酮、葱白甾体皂苷和葱白脂肪酸协同作用的结果。