蚓激酶(Earthworm fibrinolytic enzymes,EFE)是一组具有激酶和纤溶酶活性的丝氨酸蛋白水解酶,可以作为治疗血栓类疾病的药物。基于蚓激酶的酶学性质,本研究主要从化学修饰以及冷冻干燥过程中添加保护剂等方面来优化蚓激酶活力保存方法。　　 研究主要包括三部分内容:　　 一、利用三聚氯氰活化修饰剂聚乙二醇,在37℃,取14.0mg活化的聚乙二醇与蚓激酶酶液在pH9.0发生化学修饰反应,修饰效果最佳,此条件下得到的修饰酶的相对酶活力为65.5％；65℃下分别保温25min,修饰酶保留的相对酶活力为50.8％,而天然酶保留的相对酶活力仅为34.4％,说明修饰酶的热稳定性高于天然酶；37℃在固定化胰蛋白酶的作用下保温60min,天然酶残留的相对酶活力为65.9％,而修饰酶残留的相对酶活力为87.4％,说明修饰酶的抗胰蛋白酶水解的能力优于天然酶。　　 二、利用网状壳聚糖载体固定化胰蛋白酶,在pH7.4的缓冲液中,按比活力比例为1:100加入固定化胰蛋白酶与蚓激酶发生化学修饰反应,修饰效果最佳,此条件下得到的修饰酶保留的相对酶活力为77.6％；将天然酶和修饰酶置于65℃下恒温水浴25min,修饰酶保留的相对酶活力为31.6％,而天然酶保留的相对酶活力仅为17.1％,说明修饰酶的热稳定性高于天然酶。　　 三、以蔗糖和葡聚糖作为蚓激酶真空冷冻干燥过程中的保护剂,使其比例在1％-5％之间。研究表明,蔗糖在冷冻干燥过程中对蚓激酶有保护作用,但是单独添加葡聚糖则不表现出保护作用,而蔗糖和葡聚糖的混合物(4％:1％)对蛋白质酶活力的保护作用最佳,获得的酶活力为88.26％。