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山羊关节炎脑炎是由山羊关节炎脑炎病毒(Caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)引起的慢性进行性传染病,严重威胁养羊业发展。慢性感染,终身带毒,多组织炎症是该病的主要特征。抗病毒先天免疫反应是宿主防御系统的重要组成部分,通过早期感知病毒的入侵并快速启动防御机制来抑制病毒感染。干扰素β(Interferonβ,IFN-β)是评价先天免疫反应的重要标志分子,具有广谱的抗病毒和免疫调节作用。CAEV感染机体对IFN-β的影响还不清楚。为了解CAEV感染对宿主细胞先天性免疫的影响,本文分析了6种CAEV基因编码蛋白在细胞中的作用,研究了它们在IFN-β产生过程中的分子机制,为认识CAEV的致病及免疫机理提供依据。主要结果如下:(1)不同CAEV编码蛋白对细胞IFN-β转录表达的影响:病毒编码蛋白在病毒感染调节中具有重要作用,本研究选取了参与CAEV增殖调节的蛋白酶RVP、dUTP酶DU、利于病毒RNA合成的蛋白Tat、促进病毒基因组整合的蛋白IN、调节蛋白Vif及主要抗原蛋白P25,分别构建了其真核表达载体并转染293T细胞,接种SeV或VSV病毒,检测不同病毒编码蛋白对IFN-β产生的影响,通过qRT-PCR、荧光显微镜检测SeV、VSV-GFP的增殖情况。结果表明,DU和Vif可以抑制IFN-β转录及表达,促进病毒SeV、VSV的增殖,其他蛋白对IFN-β的表达无显著影响。(2)DU和Vif对抑制IFN-β产生信号通路的影响:应用qRT-PCR和荧光素酶报告系统,研究了DU和Vif对IFN-β及其调控转录因子产生的影响。应用RIG-I/MDA5/MAVS/TBK1质粒转染细胞激活IFN-β途径,通过检测由ISRE、和NF-κB 2种不同转录因子控制下的荧光酶活性表征IFN-β产生情况,结果显示,过表达DU和Vif可抑制由ISRE、NF-κB和IFN-β启动子控制下的荧光酶活性;但过表达DU或Vif蛋白,并不影响IRF3活化的IFN-β启动子调控下的荧光酶活性,这表明,DU和Vif是通过负调控IRF3上游信号转导分子的活性,抑制IFN-β信号通路的激活。缺失Vif蛋白149-164位氨基酸,其对IFN-β的抑制作用明显减弱,表明该区段氨基酸序列,对抑制IFN-β产生、促进CAEV感染具有重要作用。综上,本文发现CAEV基因编码的DU和Vif蛋白,可通过下调ISRE和NF-κB控制的IFN-β的转录,抑制IFN-β的产生,其抑制IFN-β信号通路位于IRF3上游。我们的结果表明,CAEV可通过其编码的DU和Vif蛋白,下调IFN-β的产生从而逃逸宿主细胞先天免疫反应,促进病毒的增殖。