固定化磷脂酶催化制备二十二碳六烯酸型磷脂

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磷脂(PL)是生物膜的重要组成部分,对细胞各种活性起着重要作用,它是一种常用乳化剂和抗氧化剂,在食品、化妆品及医药行业有广泛应用。二十二碳六烯酸([)HA)作为一种重要的ω-3多不饱和脂肪酸,在身体的多项机能中发挥重要作用。DHA型磷脂在拥有磷脂和DHA各自功能特性的基础上还具有多种其它他生物学活性,因此人们开始重视DHA与磷脂的双重作用。目前食用级DHA型磷脂绝大多数提取于海洋生物,但这种DHA型磷脂的来源却有多方面局限性。而工业化脂肪酶产品的出现,为DHA型磷脂酶法制备及生产提供了广阔的基础和与条件。本论文首先以DHA在反应产物中的含量为指标,利用单因素法优化了固定化磷脂酶A1(PLA1)催化富含磷脂酰胆碱(PC)磷脂与DHA酸解的反应条件。详细研究了底物摩尔比(DHA/PC)、反应温度、加酶量等对反应的影响,发现在40℃、底物比为4:1、加酶量为底物总质量20%、溶剂用量为4mL、反应时间2h条件下DHA在产物中含量较高,随后进一步利用响应面法继续优化反应条件,最终得到的最优条件为:底物比4.4:1、反应温度40℃、加酶量21%、溶剂用量4mL、反应时间2.4h,DHA含量达到17.5mg/g。然后又以DHA在反应产物中的含量为指标,利用单因素法优化了固定化PLA1催化粉末磷脂与DHA酸解的反应条件。详细研究了底物比、反应温度、加酶量等对反应的影响,发现在45℃、底物摩尔比(DHA/PL)为10:1、加酶量为底物总质量25%、溶剂用量为5mL、反应时间3h条件下DHA在产物中含量较高,随后进一步利用响应面方法继续优化反应条件,最终得到的最优条件为:底物比11:1、反应温度45℃、加酶量25%、溶剂用量5mL、反应时间3h, DHA含量达到70.1mg/g。最后根据实验数据简单讨论了PLA1催化磷脂与DHA酸解的反应机制。
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