呼吸道合胞病毒感染患儿外周血单个核细胞P2X7受体表达

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目的:通过使用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测呼吸道合胞病毒感染患儿喘息组与无喘息组(对照组)外周血单个核细胞P2X7受体表达的情况,探讨儿童呼吸道合胞病毒感染后,P2X7受体表达在喘息患儿与无喘息症状患儿之间是否有差异及其意义。对象:选取2014年6月至2015年3月于长治市人民医院3月龄至3岁住院患儿,病例均符合第七版《儿科学》小儿呼吸系统疾病(支气管哮喘除外)诊断标准,排除心源性哮喘、百日咳、支气管异物等原因引起的喘息。所选患儿入组前近两周内均未使用过糖皮质激素。实验中使用直接免疫荧光法检测RSV抗原。将符合条件的患儿根据有无明显喘息分为两组,每组各有30名,分别记录各患儿年龄、性别,经统计学分析喘息组与无喘息组无区别。材料和方法:选择呼吸道合胞病毒阳性喘息患儿与无喘息症状患儿各30例,采集入组患儿新鲜外周静脉血,用外周血淋巴细胞提取液提取分离外周血淋巴细胞,采用经典方法提取细胞RNA,检测提取结果并对RNA浓度进行检测,按照Prime ScriptTMⅡ1st Strand c DNA Synthes说明书进行逆转录合成反应,逆转录反应后样本进行PCR反应,为提高实验准确性,以β-Actin为内参照,引物基因序列由Primer5.0软件设计。实验结果:经RT-PCR法得到扩增产物,产物进行琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像系统摄图,分别记录两组患儿中P2X7受体基因m RNA表达的灰度值,记录内参照基因m RNA表达的灰度值,以内参照与喘息组或无喘息组灰度值的比值代表P2X7受体基因m RNA的表达。统计描述,喘息组患儿P2X7受体m RNA表达水平为1.19±0.35,而对照组P2X7受体m RNA表达水平为0.56±0.15,喘息组与无喘息组间比较采用F检验,以α=0.05为检验水准,两组间差异有统计学意义。研究结论:1、呼吸道合胞病毒感染患儿喘息组与对照组比较P2X7受体表达增高;2、P2X7受体参与儿童呼吸道合胞病毒感染后喘息症状的发生。
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