青枯病又称为细菌性枯萎病（bacterial wilt）,是一种土传维管束病害,一般在番茄、辣椒以及烟草等茄科植株上发病比较严重。当下对于该病的防治主要采用选育抗病品种、药剂防治和生物防治,生物防治青枯病主要集中在无致病力产青枯素菌株的开发以及生防菌的应用。近年来在青枯病生物防治研究方面中的生防菌的开发和利用成为防治中的热门话题,并取得了一定的成果。芽孢杆菌已经有100多年的发展历史了,而且随着分子生物技术的快速发展,有关于它的研究也越来越多,但是这并不代表可以忽视寻找分布在自然界中的天然菌株。本文以采自秦岭原始森林的土样为材料,筛选到一株对青枯致病菌具有较强抑菌效果的拮抗菌,并以此为目的菌株进行防效试验,主要结果如下:1. 通过对土样进行预处理,经过稀释涂布、分离并划线保存筛选到的待测细菌,再经过初筛、复筛后得到了对青枯病原菌有理想拮抗效果的菌株Y-3,其无菌发酵滤液对青枯病菌的抑菌直径为23.92 mm,综合其形态、生理生化测定以及16S r DNA基因序列分析,结果显示初步鉴定为侧孢短芽孢杆菌（Brevibacillus laterosporus）。2. 通过抑菌广谱性的平板试验测定Y-3菌株对多种病原菌在不同程度上都有抑制作用,具有抑菌广谱性。之后又对目标菌株Y-3的产酶活性进行研究,分析得出Y-3菌株具有产纤维素酶和蛋白酶的能力。通过研究Y-3菌株的抑菌活性物质稳定性发现:抑菌活性物质对紫外线照射和高温不敏感,在经过高温处理和紫外照射后,仍具有抑菌活性。为了明确Y-3菌株对青枯病菌的作用方式,应用透射电镜技术分析了青枯病原菌形态的变化情况,经过Y-3菌株无菌滤液处理后的青枯病原菌的形态发生了非常明显的变化,胞壁出现破损,内容物外渗。之后将Y-3发酵上清液处理后的叶片经过DAB和NBT染色后均出现了色素沉积,说明经过Y-3菌株的处理后产生了活性氧的积累,会诱导植株获得系统抗病性反应。3. 利用单因素试验得到Y-3进行液体发酵的最适培养基组分为:最优碳源:葡萄糖;最优氮源:蛋白胨;最优无机盐:Mg SO₄;最优的发酵条件为:最适p H:7.0;最佳接种量:1.0%;最适温度:30℃;最佳装液量:50 m L。之后再通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验以及响应面分析方法获得了Y-3菌株的最适培养基配方为:葡萄糖13.35 g/L、蛋白胨20 g/L、Mg SO4 0.7743 g/L;最适培养条件为:初始p H为7.30、装液量为50 m L、接种量为1.0%、最适温度为30℃、摇床转速为180 r/min以及培养时间为36 h。4. 利用Y-3拮抗菌的菌悬液以及发酵上清液分别对辣椒种子进行处理后,发现经过处理后的种子其萌发率有一定的提高,说明Y-3菌株对辣椒种子的萌发有促进作用。之后盆栽防效试验结果发现施用拮抗菌与施用药剂防治效果相差不大,可以显著降低植株上青枯病的发病率,相对防效达到了69.35%。