【摘 要】
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电穿孔疗法作为近些年热门的肿瘤治疗技术,利用脉冲电场联合低剂量化疗药物对患者进行治疗,减少药物副作用,提高化疗药物的药效,该技术在临床中具有良好的应用前景。但目前对于电脉冲穿孔机制、穿孔孔径大小及高压脉冲电场联合载药纳米颗粒的靶向协同效应的研究均少有研究。本文以S180肿瘤细胞和C57BL/6小鼠为试验对象,结合高压脉冲电场和纳米技术等方面的知识,进行电穿孔疗法的细胞和动物实验。本文主要内容和研究
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电穿孔疗法作为近些年热门的肿瘤治疗技术,利用脉冲电场联合低剂量化疗药物对患者进行治疗,减少药物副作用,提高化疗药物的药效,该技术在临床中具有良好的应用前景。但目前对于电脉冲穿孔机制、穿孔孔径大小及高压脉冲电场联合载药纳米颗粒的靶向协同效应的研究均少有研究。本文以S180肿瘤细胞和C57BL/6小鼠为试验对象,结合高压脉冲电场和纳米技术等方面的知识,进行电穿孔疗法的细胞和动物实验。本文主要内容和研究结果如下:（1）首先,利用荧光纳米颗粒探究细胞电穿孔孔径与电场强度以及处理时间这两个电场参数的关系。实验结果显示:经过电场作用,肿瘤细胞膜呈现电穿孔现象,荧光纳米微球进入肿瘤细胞内;随着电场强度或作用时间的提高,肿瘤细胞膜上电穿孔孔径逐渐变大。（2）其次,利用单因素分析和正交分析探究脉冲电场参数对肿瘤细胞存活率的影响程度,优化脉冲电场的窗口参数。实验结果表明:电场参数中对肿瘤细胞存活率影响最大的是场强,其次是处理时间,脉冲频率和脉冲宽度对细胞存活率的影响相当;最优电场参数组合为:电场强度10 kV·cm-1,时间180 s,频率50 Hz,脉宽10μs。（3）再其次,通过动物实验探究高压脉冲电场对肿瘤的抑制作用和针对荷瘤小鼠治疗的有效性及安全性。实验结果显示:分别随着电场强度的增大、脉冲频率的提高、脉宽的增加,小鼠肿瘤生长抑制率均呈现增长的趋势,体现出高压脉冲电场的抑瘤效应以及治疗的有效性;经过2次电场治疗、观察16 d后,实验组小鼠依旧正常存活,体现了高压脉冲电场对于小鼠的安全性。（4）最后,利用自制载顺铂磁性Fe3O4纳米颗粒,在最优电场参数下,将脉冲电场与载顺铂磁性Fe3O4联用,试验结果得出:脉冲电场与载顺铂磁性Fe3O4联合使用表现出高度协同作用或强协同作用。
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