藜蒿黄酮、多糖提取及其抗氧化研究

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鄱阳湖是我国第一大淡水湖,有着丰富的野生植物和渔业资源,其野生藜蒿生长面积大,产量高,气味芳香独特且营养价值高,作为一种特色时令蔬菜,深受大家喜欢。藜蒿作为蔬菜食用,通常食用其嫩茎部分,叶和老茎丢弃不用。研究表明,藜蒿叶和老茎中含有丰富的黄酮类化合物和活性多糖等天然活性成分,具有抗氧化、抗衰老和抗病毒等广泛的药理作用,是天然保健品原料的重要来源。本论文以藜蒿叶和老茎为原料,采用超声波辅助乙醇提取法,从藜蒿叶中提取制备黄酮,研究得到了藜蒿叶黄酮超声波辅助提取、分离纯化的最佳工艺,并测定了藜蒿叶黄酮的抗氧化能力;采用纤维素酶辅助提取制备藜蒿老茎多糖,研究得到藜蒿老茎多糖纤维素酶辅助提取的最佳工艺,并测定了藜蒿老茎多糖的抗氧化能力。为藜蒿叶和老茎资源的高值化综合利用开辟了新途径。主要研究内容与结论概括如下:(1)比较了不同提取溶剂对藜蒿提取物中总黄酮得率的影响。结果表明,50%乙醇提取的藜蒿提取物中总黄酮浓度最高,为335.02±10.63μg/mL;比较了不同提取方法对藜蒿提取物中总黄酮含量的影响。结果表明,超声波辅助提取的藜蒿提取物中总黄酮的含量最高,为37.76±0.45μg/mL。(2)以芦丁为参照,分别采用了直接测定法和硝酸铝显色法测定鄱阳湖野生藜蒿叶黄酮含量。结果表明,经硝酸铝显色反应后,芦丁和藜蒿叶黄酮的最大吸收波长基本一致,且芦丁标准曲线的线性关系良好(R2=0.9998),可以用于测定藜蒿叶黄酮含量。(3)采用响应面分析法优化超声波辅助乙醇提取鄱阳湖野生藜蒿叶黄酮的工艺。结果表明,最佳提取工艺条件为:液固比45:1、乙醇体积分数71.2%、超声时间39.5mmin、提取温度72℃、提取2次,在此条件下藜蒿叶黄酮得率为3.63%。(4)研究了六种大孔吸附树脂对藜蒿叶黄酮的静态吸附与解吸性能。结果表明,LK001大孔吸附树脂对藜蒿叶黄酮具有良好的吸附和解吸作用,能较好地分离纯化藜蒿叶黄酮,纯化后的藜蒿叶黄酮纯度达到45.26%。(5)比较了藜蒿叶黄酮粗提液和纯化后的藜蒿叶黄酮样液对自由基的清除效果。结果表明,两者都具有良好的清除自由基能力,藜蒿叶黄酮粗提液清除效果为IC50(DPPH-)=42.48mg/L, IC50(02-·)=0.71mg/mL,IC50(·OH)=0.59mg/mL;纯化后藜蒿叶黄酮样液清除效果为IC50(DPPH·)=34.75mg/L,IC50(O2-·)=0.64mg/mL,IC50(·OH)=0.54mg/mL。藜蒿叶黄酮的抗氧化能力不仅受黄酮的纯度和浓度的影响,且还与自由基的种类有关。(6)通过正交实验优化了纤维素酶辅助提取鄱阳湖野生藜蒿老茎多糖的工艺条件。结果表明藜蒿老茎多糖的最佳工艺条件:样液pH6.0、酶解温度50℃、酶解时间2h、纤维素酶用量1.5%(占干物质比重),在此条件下藜蒿老茎多糖的得率为4.77%。(7)比较了藜蒿老茎粗多糖和精制多糖对自由基的清除效果。结果表明,藜蒿老茎粗多糖清除效果为IC50(DPPH-)=4.31mg/mL,IC50(O2-·)=15.19mg/mL, IC50(·OH)=6.93mg/mL;精制多糖清除效果为IC50(DPPH·)=2.61mg/mL,IC50(02-·)=6.29mg/mL,IC50(·OH)=4.63mg/mL。藜蒿老茎粗多糖和精制多糖都具有一定的抗氧化能力,且抗氧化能力与多糖浓度成正比;在相同浓度条件下,精制多糖的抗氧化能力要比粗多糖的强,两者与Vc的抗氧化能力相比较还存在很大的差距。
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