研究背景和目的：　　大麻的活性化合物被称为大麻素(cannabinoids)，包括内源性的（如2-AG和anandamide）、天然的(如四氢大麻酚，THC)及合成的（如氨烷基吲哚大麻衍生物WIN55,212-2，WIN）三种。大麻素具有止痛、镇静、抗痉挛、抗呕吐等多种药理作用，并具有良好的抗肿瘤活性，对皮肤癌、乳腺癌、神经胶质瘤等有抗肿瘤的作用。大麻素受体主要包括CB1和CB2。CB1、CB2受体参与多种肿瘤的发生发展，而大麻素能激活大麻素受体使其充分的发挥作用。国外和我们的研究表明 CB1/2在肝癌细胞内高表达，体内外实验均证实THC对肝癌细胞HepG2具有抑制作用，但对肝癌细胞BEL-7402的影响如何呢？不清楚。国外和我们的体外实验研究均表明，大麻素WIN对肝癌细胞HepG2具有抗肿瘤作用，但其对肝癌移植瘤有何影响？亦不清楚。　　本课题通过大麻素THC对肝癌细胞BEL-7402细胞增殖和凋亡的影响,并初步探索其机制；并进一步研究大麻素对肝癌细胞HepG2移植瘤的影响，为临床肝癌分子靶向治疗提供依据。　　方法：　　第一部分：THC抑制肝癌细胞BEL-7402增殖和诱导其凋亡的研究　　将BEL-7402细胞分成对照组，不同剂量大麻素(THC)处理组。　　MTT法测定THC对BEL-7402细胞增殖的影响；　　DNA梯度电泳法和流式细胞技术检测分析各实验组细胞凋亡情况；　　用QPCR技术检测各实验组细胞中基因c-myc和PPARg的表达情况；　　Western Blotting法检测各实验组细胞中大麻素受体 CB1、CB2、caspase-3、c-myc和PPARg蛋白表达情况；　　浓度为10μmol/L的THC处理细胞后，在不同时间点以分光光度法检测caspase-3的活性。　　第二部分：WIN对肝癌HepG2移植瘤影响的研究　　15只裸鼠：　　裸鼠分成空白组（n=3），溶剂组（n=6）,药物WIN组（n=6）。药物WIN组接种癌细胞HepG2，成瘤模型成功后注射WIN注射液治疗。溶剂对照组接种癌细胞HepG2，成瘤模型成功后注射溶剂；空白组不接种癌细胞HepG2，与上述两组同时注射溶剂做为对照。药物治疗持续15天。治疗结束，剥离肿瘤检测指标。　　每3天测一次裸鼠体重和肿瘤体积检测裸鼠及体内肿瘤的生长情况；　　模型实验结束后照相、测量肿瘤的最终重量；　　用QPCR技术检测WIN组和对照组肿瘤中基因c-myc和PPARg的表达情况;　　Western Blotting法检测WIN组和对照组肿瘤中蛋白c-myc和PPARg的表达水平。　　结果：　　第一部分：THC抑制肝癌细胞BEL-7402增殖和诱导其凋亡的研究　　BEL-7402细胞中大麻受体CB2的表达较L02正常肝细胞明显增强，CB1在两个细胞系中表达不明显；　　MTT法检测不同浓度THC(0、1、10μmol/L）的细胞生长抑制率分别为0％、6.31%、29.32%,抑制作用有统计学意义；　　DNA梯度电泳法检测THC浓度为10μmol/L组相对于对照组可见细胞凋亡条件下特征性梯状DNA条带；　　流式细胞术检测不同浓度THC(0、1、10μmol/L）组凋亡率分别为5.20%、7.25%和12.69%，THC（1、10μmol/L）组结果具有统计学意义（P<0.05）；　　QPCR和Western Blotting结果显示THC能抑制BEL-7402细胞中c-myc的表达（P<0.05），上调 PPARg的表达（P<0.05），同时也诱导 BEL-7402细胞中caspase-3蛋白表达（P<0.05）；　　分光光度法检测在THC(0、10μmol/L)作用BEL-7402细胞0、24、48h后细胞中caspase-3的活性，时间点24h和48hTHC(10μmol/L)分别对应24h、48h THC(0μmol/L)能激活蛋白caspase-3的活性（P<0.05）。　　第二部分：WIN对肝癌细胞HepG2移植瘤影响的研究　　WIN组抑瘤率为55.16%，最终瘤重WIN组比对照组小（P<0.05）；　　两组肿瘤都为生长趋势，WIN组肿瘤体积增加的幅度比对照组更缓慢；　　QPCR和Western Blotting检测结果显示WIN能抑制c-myc的表达（P<0.05）；　　QPCR和Western Blotting检测结果显示WIN对肝癌细胞BEL-7402中PPARg的表达具有上调作用（P<0.05）。　　实验结论：　　1.大麻素THC在体外能抑制肝癌细胞BEL-7402的增殖和促进其凋亡；　　2.大麻素THC在体外抗肝癌作用机制与caspase-3、c-myc、PPARg有关；　　3.大麻素WIN能抑制肝癌细胞HepG2移植瘤的生长；　　4.大麻素WIN抑制肝癌细胞HepG2移植瘤的生长与c-myc、PPARg有关。