舌苔形成与多层角质形成细胞(KC)凋亡的关系及其分子机制的研究

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舌诊是指导中医辨证论治的重要诊断依据,舌苔是临床察舌的主要内容。近年来的研究表明,表皮等复层扁平上皮的角质形成细胞在由基底层向棘层、颗粒层、角质层生长、分化过程中发生了细胞凋亡,而构成舌苔的主体即舌粘膜上皮细胞也属于复层扁平上皮。因此,我们从舌苔上皮细胞凋亡及其相关基因表达的角度出发,在mRNA和蛋白质两个水平探讨常见舌苔形成的机理,以促进舌诊的客观化、微观化和现代化。  本研究:将观察对象根据有无各系统器质性疾病及舌苔表现,分为正常薄白苔、病理薄苔、厚苔、剥苔组,每例用消毒丝瓜络用力刮取舌苔后离心、洗涤、涂片。  采用TUNEL法检测舌苔涂片中舌粘膜上皮细胞的凋亡情况。  运用原位分子杂交技术和CMIAS真彩色病理图像分析系统检测舌上皮细胞中TGF-β3、bax、fas、bcl-2 mRNA的转录水平。  应用免疫组织化学LDP法和图像分析技术检测舌上皮细胞中TGF-β3、Bax、Fas、Bcl-2蛋白的翻译水平。  主要研究结果如下:  TUNEL法检测结果显示:四种常见舌苔其舌上皮细胞都可见细胞凋亡发生,剥苔组的凋亡指数高于其他各组,而厚苔组的凋亡指数低于其他各组(均为P<0.05)。厚苔组与剥苔组凋亡指数差异有非常显著性意义(P<0.01)。原位杂交和免疫组化检测结果表明:与正常组比较,厚苔组TGF-β3、bax基因表达和蛋白产物显著降低,剥苔组bax、fas表达水平显著升高而TGF-β3表达水平显著降低(均为P<0.05)。厚苔组与剥苔组bax表达水平差异有非常显著性(均为P<0.01)。  综合上述研究结果表明:  舌上皮细胞在增殖、分化的过程中有一部分细胞发生了细胞凋亡,舌苔厚度与舌上皮细胞增殖、分化和凋亡的动态平衡有关。舌苔厚度变化伴随有凋亡相关基因表达的变化:在上皮细胞中起促进凋亡作用的基因TGF-β3、fas、bax表达上调时,细胞凋亡增加,舌苔变薄;反之则舌苔变厚。
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