改良皮质骨切开快速正畸机制的基础研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lingshao2009
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目的:本实验中我们用新西兰大耳白兔子建立改良皮质骨切开快速正畸的动物模型,从组织形态,破骨细胞分化表达情况,移动牙压力侧与张力侧骨组织代谢相关基因mRNA表达的水平,删选与牙移动密切相关的因子等层面来探讨改良皮质骨切开快速正畸的机制。方法:本实验中,我们将50只新西兰大耳白兔子随机分成5组,每组10只。采用自身对照,左侧下颌为实验侧即改良皮质骨辅助正畸,右侧下颌为对照侧即传统正畸。下颌两侧切牙为支抗牙,使用4oz的力值拉下颌第一磨牙向近中方向移动。分别在手术后第1,3,5,7,14天,将其麻醉,采用锥形束CT扫描并测量牙移动的距离,之后将实验兔子用过量麻药麻醉处死,立刻取移动牙及其近远中侧的骨组织研究观察。其中每组5只实验动物用于形态学研究,采用HE染色,TRAP染色等实验手段来观察。另外的5只实验动物用于分子水平的研究,提取骨组织总RNA,逆转录成cDNA后,通过Real-time PCR实验技术来检测RUNX-2,Osteocalcin,TRAP,NFATc1,JDP2,Fra2,Ctsk,Ctr, RNAKL/OPG,GAPDH的表达水平。并且采用多元逐步回归方法来删选与牙移动密切相关的因子。结果:实验组较对照组牙移动快,说明实验模型成功建立。锥形束CT测量牙移动距离显示,实验组牙移动距离在第1,5,7天明显高于对照组,并且差异有统计学意义(P<0.05),但在第14天两组牙移动距离差异并不明显。形态学观察显示,压力侧实验组较对照组有更多的TRAP+多核细胞计数以及骨吸收陷窝,且在第3,7,14天破骨细胞计数的差异有统计学意义(P<0.05)。张力侧,实验组相对对照组较早的出现骨沉积线,差异不明显。另外,Ctsk, TRAP的mRNA在第5天显著表达(P<0.05);CTR的mRNA在1-7天均有高表达量(P<0.05);JDP2,NFATc1的mRNA表达趋势相一致,在第7天达到峰值(P<0.05);Fra2,RANKL/OPG的mRNA在第5天升高,并且在第5,7,14天差异有统计学意义(P<0.05);OCN的mRNA在第5-14天高表达,差异有统计学意义(P<0.05);RUNX-2在第3天高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。而多元逐步回归显示,在第1,3,14天JDP2与牙移动距离呈正相关;OCN在第5天时,与牙移动距离呈正相关;第7天Fra2,与牙移动距离呈正相关。结论:改良皮质骨去除辅助正畸能加快牙移动速率,但并不能增加牙移动总距离;结合形态学观察、骨代谢相关因子的表达情况及多元逐步回归分析可得知,在牙移动的早期阶段破骨细胞代谢较成骨细胞在快速牙移动过程中可能起的作用较为明显;从骨改建相关因子表达情况来看,在牙移动的早期阶段改良皮质骨去除辅助正畸快速牙移动过程中破骨细胞可能存在两轮分化。
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