小黑麦种子抗真菌蛋白的纯化和分析

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该文以木霉为指示菌,对小黑麦中饲237种子中的抗真菌蛋白作了一定程度的分离纯化和性质研究.经乙酸浸提,硫酸铵分级沉淀, DEAE和CM离子交换柱层析,分子筛和苯甘疏水柱层析,得到的抗真菌蛋白活性提高110倍.经苯甘疏水柱得到一条蛋白带,纯度在99﹪以上,分子量约为30,500Dal.蛋白质N-未端序列测定证明为几丁质酶,与大麦几丁质酶有根高的同源性.比活294miliunits/mg,最适pH6.0最适温度为37℃.同时发现在两组分子量不同、疏水性不同的蛋白组分中具有β-glucanase活性.凝胶过滤分析大分子量组分中的β-葡聚糖酶(β-G1)分子量约为51,000Dal,小分子量组分中的β-哺聚糖酶(β-G2)分子量约为23,000Dal.β-G1比活1581U/g,最适pH5.2最适温度30~37℃.经苯甘柱分离后β-G2活性提高约10倍,比活640U/g.小黑麦的几丁质酶和β-葡聚糖酶都具有较强的抗木霉活性,并且二者有协同抑制作用.
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