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本文对采自西藏的青稞酒酒曲利用传统培养和变性梯度凝胶电泳(DGGE)相结合的方法,系统地分析其微生物的多样性。获得如下结果。1.西藏青稞酒酒曲中微生物群落。对其酒曲中微生物分析结果表明,酒曲微生物是一个混合群体,主要由真菌和细菌组成。其中分离真菌占总菌株数54.4%,分离细菌占总菌株数45.6%。2.西藏青稞酒酒曲中的真菌群落构成。通过对真菌DGGE条带和纯化培养菌株的ITS序列分析,得到的真菌分属10个属,共13个种。分别是Saccharomycopsis malanga、Torulaspora delbrueckii、Pichia jadinii、Rhizopus oryzae、Cryptococcus adeliensis、Mucor circinelloides、Saccharomyces cerevisiae、Rhizomucor variabilis var. regularior、Saccharomycopsis fibuligera、Rhizopus microsporus、Mastigobasidium intermedium、Brettanomyces custersianus、Rhizopus microsporus。3.西藏青稞酒酒曲中的细菌群落构成。通过对细菌DGGE条带和纯化培养菌株的16S rDNA序列分析,得到的细菌分属9个属,共22个种。分别是Escherichia coli、Marine bacterium、Erwinia tasmaniensis、Pantoea agglomerans、Bacillus cereus、Lactobacillus coryniformis subsp. Torquens、Lactobacillus curvatus、Lactobacillus plantarum、Pediococcus pentosaceus、Leuconostoc mesenteroides、Lactobacillus brevis、Pediococcus acidilactici、Lactobacillus sakei、Lactobacillus casei、Leuconostoc citreum、Lactobacillus vini、Lactobacillus paraplantarum、Bacillus simplex、Bacillus pumilus、Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus paracasei、Acetobacter indonesiensis。4.西藏青稞酒酒曲中存在有害菌群。其中包括Escherichia coli等有害菌群。也包括Acetobacter indonesiensis等可能本身无害,但是对酒的酿造不利的菌群。这些菌群可以加快青稞酒变酸,加快青稞酒腐败变质,不易储藏。5.样品总DNA的提取。利用珠打法提取酒曲中的总DNA进行DGGE分析,从结果中可以看出珠打法能够满足DGGE实验对DNA的要求,可以较好的分析酒曲中微生物的群落结构。6.传统培养结合非培养(DGGE)的实验可行性。从实验中可以看出培养方法和非培养方法能够很好的结合,非培养为培养方法提供基础的菌群关系,培养基和培养条件信息,而培养方法可以补充非培养方法没有发现的菌群,得到菌株加以驯化和利用,两种方法相互补充,可以满足较全面的了解青稞酒酒曲中的群落关系的要求。