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杜仲(Eucommia ulmoides Olive)属于杜仲科植物,是我国传统名贵药用植物,具有滋补、降压、抗氧化、抗菌、抗炎等功效。杜仲叶中富含活性成分绿原酸,其为工业提取绿原酸的重要植物原料之一。绿原酸属于苯丙素类化合物,具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性,其为食品、药品、化妆品工业的重要原料。本文研究的另一活性成分杜仲醇,仅在杜仲等少数植物中存在,研究表明其与胶原蛋白合成有关。本文对杜仲叶中绿原酸、杜仲醇的提取分离工艺及其在杜仲体内的积累动态进行了研究。
利用正交试验分别研究了杜仲叶中绿原酸的水提工艺和醇提工艺。在水提和醇提最佳工艺的基础上,确定水提法为杜仲叶中绿原酸的最佳提取方法,其工艺条件为:料液比1:8,提取时间70min,提取温度80℃,以水作为溶剂提取杜仲叶两次,测得此条件下的绿原酸得率为1.78%。
利用水提法对杜仲叶进行提取。粗提物经醇沉工艺除杂后,先后利用D-101大孔吸附树脂、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析对所得浸膏进行纯化,同时利用薄层色谱对相关化合物进行跟踪,最终分离纯化得到化合物1和化合物2。经薄层色谱、核磁共振等分析方法,确定所得化合物为绿原酸(1)和杜仲醇(2)。通过对所得化合物的最小抑制浓度进行测定,实验结果显示绿原酸对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠杆菌均有良好的抑制活性。
对杜仲叶、皮中绿原酸和杜仲醇的积累动态规律进行了研究,同时考查了叶林栽培模式和乔林栽培模式对两种活性成分积累动态规律的影响。研究表明两种化合物在叶中的含量均远大于在皮中的含量。叶林模式与乔林模式比较,叶林叶中绿原酸含量较高,且在6月达到峰值。乔林叶中杜仲醇含量较高,且在9月达到峰值。