Med19基因在骨肉瘤中的功能研究及其临床意义

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背景和目的:最近,有研究表明Med19基因参与多种肿瘤的发生如:肺癌、乳癌、胃癌等。本研究试图探讨Med19基因在骨肉瘤中的临床意义及在骨肉瘤细胞Saos2增殖中的功能。   方法:免疫组化方法检测50例骨肉瘤及15例瘤旁正常组织中Med19蛋白的表达,并结合临床资料进行无病生存期分析及总生存期分析。构建Med19-siRNA及Med19-OE(over expression,过表达)慢病毒载体感染骨肉瘤Saos2细胞,Real time-PCR及Western blotting验证Med19的沉默效率及过表达效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Real-time PCR检测相关促进肿瘤增殖基因表达,BALB/c裸鼠移植瘤实验检测肿瘤生长情况。   结果:骨肉瘤组织中Med19蛋白的表达明显高于瘤旁正常组织(P<0.01),Med19蛋白表达阳性组无病生存期及总生存期均短于表达阴性组(P<0.05)。转染Med19-siRNA后细胞增殖能力较对照组显著降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著增加。转染Med19-OE后细胞增殖能力较对照组显著增加(P<0.05),S期及G2/M期细胞比例升高。Med19基因沉默后CDC25、MCM、E2Fs基因家族均较对照组表达下降(P<0.05)。BALB/c裸鼠移植瘤实验显示Med19-siRNA组肿瘤体积较对照组有显著差异(P<0.05)。   结论:Med19蛋白与骨肉瘤患者无病生存期及总生存期关系密切。有可能作为判断预后和生存的指标。Med19基因沉默可显著抑制Saos2细胞体外的增殖能力,诱导G0/G1期阻滞,并抑制裸鼠Saos2细胞移植瘤的生长。过表达Med19基因可促进Saos2细胞增殖,诱导细胞由G0/G1期向S期过渡。其作用机制可能与CDC25、MCM、E2Fs基因家族有关。
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