核糖体蛋白RPL15多克隆抗体的制备与其功能的初步研究

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核糖体的生物合成是一个复杂精细的过程:核糖体蛋白在细胞质中合成,进入细胞核与成熟的rRNA结合组装成核糖体亚基,在细胞质中形成成熟的核糖体,这一系列的过程都需要非常精密的过程才可以完成。随着对核糖体蛋白的不断研究发现核糖体蛋白具有与癌症有关的特殊功能。在肿瘤细胞中很多核糖体蛋白都异常调节,有些核糖体蛋白参与癌症的发生。核糖体蛋白的特殊功能主要有:(1)癌基因或肿瘤抑制基因的活化与一些核糖体蛋白的表达有关;(2)核糖体蛋白参与核糖体压力应答和DNA损伤应答;(3)某些核糖体蛋白基因的突变与癌症的开始有关。  近年来,随着对核糖体蛋白RPL15(Ribosomal Protein L15)的深入研究发现,RPL15的表达水平与多种疾病的发生有密切的关系。在不同的癌细胞中,RPL15的表达量各不相同,例如在食管癌和胃癌中RPL15高表达,在胰腺癌中RPL15低表达,在先天性再生障碍贫血症中缺失RPL15基因。由于RPL15参与癌症的发生,所以进一步研究RPL15具有重要作用。  本文成功制备并纯化了RPL15的多克隆抗体,且用蛋白免疫印迹的实验证实抗体的特异性。用免疫荧光确定RPL15定位于核仁且呈点状分布,用连续蔗糖密度梯度离心确定RPL15定位于60S大亚基上。通过流式分析,RPL15干涉后细胞周期阻滞在G1期,这为后续深入研究核糖体蛋白RPL15分子的功能奠定了良好的基础。
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