醇类对溶菌酶空间结构和折叠过程的影响

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本文利用多角度激光光散射仪和圆二色谱仪研究小分子水溶性一元醇和多元醇对溶菌酶分子的稳定性以及对变性溶菌酶的空间构象和折叠复性的影响。同时也研究了醇的种类和浓度对溶菌酶复性收率的影响。发现一元醇的烃基能和蛋白质分子表面的疏水区结合,缚于蛋白质分子表面,屏蔽蛋白分子间的一些疏水相互作用,使蛋白分子在上述溶液中更趋向于分散不聚集;甘油和乙二醇的亲水性很强,不能通过疏水作用和蛋白质分子结合,它们是通过增加溶液粘度和蛋白质表面水化层厚度,起到稳定蛋白质的作用;在一元醇、甘油和乙二醇溶液中天然态和变性溶菌酶分子的稳定性均随着醇浓度的增大而提高,而变性酶分子在醇溶液中形成过多的α螺旋和β折叠等二级结构;α螺旋过多不利于酶的折叠复性;β折叠过多会导致变性溶菌酶聚集;只有较低浓度的多元醇和甲醇有辅助变性溶菌酶复性的作用,其中10%甲醇,20%甘油和30%乙二醇有利于促进酶的复性。
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