柑橘衰退病和碎叶病新型脱毒方法的研究

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柑橘种植面积和产量逐年增加,在栽培过程中,柑橘多采用无性繁殖,往往易感染一种或几种病毒,病毒的为害已成为制约柑橘产业发展的主要的障碍,因此,柑橘病毒的有效控制至关重要。在前人研究的基础上,本研究重点探讨中药抗病毒剂处理与热处理,微芽嫁接处理在柑橘衰退病和碎叶病病害的脱毒方法中的应用,以期找到快速有效的脱毒方法,为优良品种的扩大繁殖提供无毒苗木。实验材料为华中农业大学国家果树脱毒种质资源室内保存中心网室中保存的,经检测带病毒的柑橘品种,实验主要分为以下4部分。1.对带柑橘衰退病毒的江西蜜柑,市文蜜柑,.稻叶蜜柑,处红柚,翡翠柚进行微芽嫁接号恒温热处理(37℃,处理50d)与变温处理(40℃,14h光照,30℃,10h黑暗,处理30d)脱毒,采用RT-PCR法进行脱毒检测。结果显示可以脱除柑橘衰退病。2.对普通嫁接苗发芽后采用恒温(37℃,处理50d)与变温(40℃,14h光照,30℃10h黑暗,处理30d)热处理脱毒,采用RT-PCR法与斑点杂交方法进行脱毒结果检测。结果表明,通过以上条件单独热处理不能脱除柑橘衰退病。3.对瓯柑、江西蜜柑带毒苗采用中药制剂处理与缓冲间热处理(9月10号-10月30号,白天最高45℃,不低于42度,晚上最低温25℃,处理50d)结合的方法脱毒。中药制剂处理,每5d处理一次,共处理80d,处理完成后,采用RT-PCR法检测脱毒结果,表明此方法可以脱除衰退病和碎叶病病毒。此外,对瓯柑品种在药剂处理完成后的1d、3d、5d、7d、9d时,取样测定抗性相关酶PPO、POD、SOD酶活性,检测药剂处理对抗性相关酶活性的影响,结果显示处理后PPO、POD、SOD活性与对照相比均升高。4.对永春芦柑微芽嫁接苗进行中药制剂A和B结合处理脱毒,处理完成后采用,RT-PCR法检测脱毒结果,结果显示可以脱除柑橘衰退病和碎叶病病毒。
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