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随着经济迅速发展及人口的日益密集,近岸海域面临着越来越大的环境及生态压力,污染物的排放与沿岸不合理的开发,使我国成为世界上海洋环境污染最严重的国家之一。在自然界中。微生物与环境之间有着特定的关系,彼此影响,相互依存,构成特殊的生态系统,其种群的不同能较好的反应环境的变化,但与海洋污染相关的微生物群体尤其是真核微生物多样性状况很少见有报道。本文以胶州湾不同地点(石老人潮间带、海泊河入海口、李村河入海口)、不同季节(春季4月、夏季7月、秋季10月、冬季1月)的沉积物作为样品,测定其主要环境污染指标,并通过传统的分离培养及现代分子生物学两种手段对胶州湾不同污染区的半知菌多样性进行研究,探讨半知菌菌落结构与环境污染的相互关系。主要研究内容及结果如下:
⑴从所选环境污染指标的检测结果看,石老人站位各个指标的含量均为最低,海泊河站位各污染指标基本处于石老人和李村河之间,李村河站位,除总氮含量低于海泊河,其他各项污染指标均为最高,石老人、海泊河、李村河三站位按污染等级划分分别属于轻度污染区、中度污染区及重度污染区。石老人各污染指标随季节变化不明显,海泊河与李村河各污染指标随季节的变化波动比较大。
⑵用5种不同的培养基对胶州湾近岸污染环境可培养半知菌进行选择性分离,共得到235株半知菌,其中YM培养基、MPDA培养基对半知菌的分离效果最好,分别占分离总量的26.4%和24.7%。半知菌的菌落结构在时空上存在明显的差异,半知菌的种群及数量在站位上为分布趋势为海泊河>石老人>李村河,在季节上为夏秋两季>春冬两季。
⑶不同季节样品的DGGE指纹图谱聚类分析结果显示,同一站位不同采样点之间表现出比较高的聚类性,不同站位之间半知菌多样性表现出比较明显的差异。对DGGE优势条带的测序结果显示,石老人轻度污染区的优势条带主要是一些不可培养真菌(Uncul tured fungus)、黄青霉(Penicillium chrysogenum)。海泊河中度污染区半知菌种类比较丰富,链格孢属(Al ternaria)、Penicill ium phial osporum均在海泊河站位占有比较明显的优势。李村河重度污染区半知菌种类很少,优势条带主要是一些阿米巴虫(Uncultured Euamoebida)、腐霉(Pythium insidiosum)等病原微生物。
⑷通过传统分离及DGGE两种方法调查的半知菌菌落结构与环境污染因子的CCA结果可知,铅、汞、锌、铜、镉、重金属综合污染指数、PAHs、总磷8项环境污染指标聚为明显的一类,对半知菌菌落结构表现出很强的相关性,总氮指标对半知菌菌落结构的影响相关性比较弱。