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益生菌具有多种有益于动物机体的生物学功能,因此被广泛应用于营养、保健和医学等领域。目前已经有许多科学研究表明,灭活后的益生菌不仅在生物学功能上与活菌相同或相似,而且安全性、稳定性、抗逆性等方面具有更大的优势。多糖是机体的供能物质,具有防止病原微生物侵入机体、抑制肿瘤细胞增殖和调节机体免疫力等作用,而且多糖的毒副作用很低,在畜牧业生产上是一种比较理想的饲料添加剂。目前,国内对于免疫增强剂的研究多限于一种或一类,对于多糖与益生菌的联合作用却鲜有报道。因此,本试验选用海兰褐雏鸡作为试验动物,分别设置空白对照组(BC)、环磷酰胺模型组(CY)(80mg/kg.bw)、浒苔多糖组(CY+EP)(100mg/kg.bw)、低(1x108CFU/mL)、中(1x109CFU/mL)、高(1x1010CFU/mL)剂量的灭活枯草芽孢杆菌与浒苔多糖联合组(CY+EP+IVC)6个试验组。首先制备雏鸡免疫抑制试验模型,除空白对照组胸肌注射生理盐水外,剩余5组均注射等量的环磷酰胺,连续注射4天,然后进行灌胃试验。于灌服7d、14d、21d后,各组随机选取相同数量的雏鸡,心脏采血后分离血清,测定各组雏鸡血清中新城疫(ND)抗体效价、IgG和IgM以及IL-2和IFN-γ的含量;采集胸腺、脾脏和法氏囊,测定其免疫器官指数;测定十二指肠洗液中SIgA含量及组织中β-防御素9(AvBD9)和β-防御素13(AvBD13)mRNA表达情况。其主要试验结果如下:(1)浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫抑制雏鸡免疫器官指数的影响。与空白对照组相比,环磷酰胺组雏鸡的免疫器官指数均降低,并且在试验期内,胸腺指数和法氏囊指数与空白对照组差异极显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,免疫抑制雏鸡灌服浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌后,免疫器官指数均有不同程度升高,且浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫器官指数下降的提高作用较单一灌服浒苔多糖更为显著。研究结果表明,环磷酰胺可显著降低雏鸡的免疫器官指数,而浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌可以提高免疫器官指数,且二者联合应用的效果更好。(2)浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫抑制雏鸡血清抗体效价的影响。与空白对照组相比,环磷酰胺组雏鸡血清抗体效价降低,其中在灌胃7d和14d后,与空白对照组差异显著(P<0.05),灌胃21d后,与空白对照组差异性极显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,免疫抑制雏鸡灌服浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌后,血清ND抗体效价均极显著升高(P<0.01),且浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌联合组对抗体效价的提高作用较单独灌服浒苔多糖效果更好。研究结果表明,环磷酰胺可降低雏鸡血清抗体效价,而浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌可以提高效价,且二者联合应用的效果更好。(3)浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫抑制雏鸡血清免疫球蛋白和细胞因子含量的影响。与空白对照组相比,环磷酰胺组雏鸡血清免疫球蛋白(IgG和IgM)和细胞因子(IL-2和IFN-γ)含量均降低;与环磷酰胺组相比,免疫抑制雏鸡灌服浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌后,能够提高血清IgG、IgM、IL-2和IFN-γ含量,并且除IFN-γ外,浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌的联合作用对IgG、IgM和IL-2含量的提高比单独灌服浒苔多糖效果更好。研究结果表明,环磷酰胺可降低雏鸡血清中免疫球蛋白和细胞因子含量,而浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌可以提高其含量,且对于IgG、IgM和IL-2来说,二者联合作用效果更强。(4)浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫抑制雏鸡十二指肠洗液中SIgA含量的影响。与空白对照组相比,环磷酰胺组雏鸡十二指肠洗液中SIgA含量均显著降低(P<0.05);与环磷酰胺组相比,免疫抑制雏鸡灌服浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌后,能够提高免疫抑制雏鸡十二指肠洗液中SIgA含量,且浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌联合组对SIgA含量的提高作用较单独灌服浒苔多糖效果更显著。研究结果表明,环磷酰胺可降低雏鸡十二指肠洗液中SIgA含量,而浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌可以提高其含量,且二者联合使用的效果更好。(5)浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌对免疫抑制雏鸡组织中AvBD9和AvBD13mRNA表达情况的影响。与空白对照组相比,环磷酰胺组雏鸡组织中AvBD9和AvBD13mRNA表达均极显著降低(P<0.01)。与环磷酰胺组相比,免疫抑制雏鸡灌服浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌后,组织中AvBD9和AvBD13mRNA表达量均有不同程度的升高,其中AvBD13mRNA表达量随联合组中灭活枯草芽孢杆菌浓度的升高而升高。研究结果表明,环磷酰胺可降低雏鸡组织中AvBD9和AvBD13mRNA表达,而浒苔多糖和灭活枯草芽孢杆菌可以提高其含量表达,且二者联合作用效果更强。综上所述,浒苔多糖联合灭活枯草芽孢杆菌可通过调节免疫抑制雏鸡免疫器官的发育、血清中的抗体效价、免疫球蛋白和细胞因子含量、十二指肠洗液中SIgA含量和组织中AvBD9和AvBD13mRNA相对表达等途径来发挥免疫调节作用。