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本论文针对水产养殖现行使用的微生物制剂作用时效短,在使用过程中优势地位不明显等缺陷,基于微生态理论和芽孢杆菌作为微生态制剂的优良特性,从对虾养殖环境获得一批产芽孢细菌,并加以鉴定;以胞外消化酶为指标分离筛选可高效降解水产养殖残余饵料淀粉、蛋白及脂肪作用的若干株产芽孢功能菌,通过酶活性测定,确定一株地衣芽孢杆菌S-40作为潜在益生菌进行了对虾养殖实验;研究了对虾养殖环境的细菌群落组成,主要研究结果如下:1.构建了对虾养殖环境细菌16SrDNA文库,研究其细菌群落组成。结果表明:对虾肠道细菌分属于变形细菌(Proteobacteria)和厚壁菌类群(Firmicute),Proteobacteria占据了绝对优势,为98.7%,其中γ-Proteobacteria为97.4%;养殖水体菌群主要由变形细菌(24.1%)和拟杆菌门(17.7%)组成,其中α-Proteobacteria所占比例为21.5%;养殖环境表层沉积物的细菌多样性要丰富得多,有变形细菌(52.3%),拟杆菌门(Bacteroidetes,9.3%),浮霉状菌(Planctomycete,4.7%),厚壁菌类群(Firmicute,1.9%)和放线菌门(Actinobacteria,0.9%)。此外,水样和沉积物中蕴含着数量丰富的单细胞藻类,它们的比例分别高达55.7%和23.4%。2.从对虾养殖环境(对虾肠道和虾池表层沉积物)分离筛选出191株产芽孢细菌,细胞形态和RFLP分型后,对其中70株菌进行了生理生化以及分子生物学方法鉴定。结果显示它们分属于短芽孢杆菌属(2株)、芽孢乳杆菌属(2株)、类芽孢杆菌属(4株)和芽孢杆菌属(44株)。其中芽孢杆菌属中,我们鉴定得到13个种,包括环状芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、花园芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、泛酸芽孢杆菌、短小芽孢杆菌,坚强芽孢杆菌、纺锤芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。3.利用选择性培养基,从前期工作得到的产芽孢细菌中分别筛选出9株具有较高淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性的菌株,对其发酵条件以及粗酶液性质进行了初步的研究。结果表明多株菌在一定的温度、pH及盐度区间内均有较强的酶活力,一株地衣芽孢杆菌S-40由于其良好而稳定的消化酶活性,作为养殖水体添加剂进行对虾养殖实验。4.应用从对虾养殖环境筛选的一株地衣芽孢杆菌S-40,作为潜在的微生态制剂菌株,分别以10~3cfu/mL,10~4cfu/mL,10~5cfu/mL三种不同浓度添加到凡纳滨对虾养殖水体中,测定了饲养40天后对虾消化道的总菌和弧菌数及多项免疫指标。结果显示:与对照组对虾相比,所有实验组对虾消化道的弧菌数有显著下降,而总菌数没有呈现显著性差异;所有实验组中对虾血淋巴上清液的血细胞数,酚氧化酶活性(PO)均有显著性上升,超氧化物歧化酶(SOD)仅在10~5cfu/ml时有显著上升,菌剂的加入对对虾血淋巴上清液的的蛋白浓度并无显著影响。5.本研究选用微孔淀粉为吸附剂吸附地衣芽孢杆菌S-40菌株芽孢,通过多因素分析,确定最佳的吸附包埋条件:pH7.5,温度30℃,吸附时间1.5h。